瘦肉精快速检测卡是采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术设计的一种快速检测试剂,可同时检测尿液样品中的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三类瘦肉精。瘦肉精是一类人工合成的β-受体激动剂,根据结构差异分为盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇。因该类药物可以提高瘦肉率,减少脂肪沉积和促进动物生长,被一些畜牧养殖户和养殖企业作为养殖促进剂使用。人食用了饲喂瘦肉精的禽畜产品后,残留的瘦肉精可引起食物中毒,牲畜产品中瘦肉精残留已成为公众关注的社会问题。因此,世界许多国家禁止在饲料中使用瘦肉精。瘦肉精快速检测卡可同时测定猪尿中的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇,提供生猪饲养时是否使用瘦肉精的依据。食品安全快速检测的基本原则有哪些?异丙威快速检测卡原理
胶体金法抗原检测卡实际上主要是由一条吸水纸(成分为硝酸纤维素)构成,好比是一条马路。这条路上有四个公交站点,一站是一个包含玻璃纤维的样品孔(标记为S,即Sample),第二站是胶体金纳米颗粒与抗体的结合物,它们通过静电相互作用紧紧相连,并可以结合抗原,第三站是含有抗体的条带(标记为T,即Test),这种抗体会与胶体金/抗体/抗原三元复合物形成四元夹心复合物,第四站是含有免疫球蛋白的条带(标记为C,即Control),它可以与胶体金/抗体结合物产生相互作用形成复合物。异丙威快速检测卡原理胶体金的制备并不难,但要制好高质量的胶体金却也并非易事。
国内外食品安全中常用的快速检测技术有化学比色分析检测技术、分子生物学分析检测技术、免疫学分析检测技术以及生物传感器、纳米技术等。食品快速检测技术手段主要有哪些?(1)化学比色检测技术是食品安全快速检测中常用的如纸片法、试剂盒(卡)等方法,与一般的仪器分析方法相比,具有价格低、操作相对简便、结果显示直观、一次性使用、不需检修维护、专一性等优点,但方法灵敏度较低。(2)酶抑制技术测定样品和农药的种类有限,主要针对有机磷和氨基甲酸酯,欧美将此法作为普查农药残留和田间实地检测的基本手段,但酶抑制法的假阳性、假阴性率也较高。
硝化纤维膜上的特异性抗艰难梭菌抗原(GDH)抗体使纤维膜敏化。绑定在膜上的抗体与GDH的结合保障了检测的特异性。 检测开始前,必须用试剂盒所提供的稀释缓冲液对粪便样本进行稀释。之后加入4滴粪便样本悬浮液到检测卡上。通过被动扩散,混合液中的样本材料向前移动,然后与吸附在硝化纤维膜上的抗体发生接触,如果样本中含有GDH,那么抗原混合物就会与抗体结合并在膜上显示出一条红线。然后溶液会继续向前扩散,碰到质控线后会显现出红色,以此证明实验的有效性。检测结果只要15分钟就可以看到。层析法免疫胶体金检测试剂是服从于抗原抗体反应的特性。
胶体金固相免疫测定法:(1)斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上,与特异性抗体反应后,再滴加胶体金标记的第二抗体,结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集,形成肉眼可见的红色斑点,此称为斑点免疫金染色法(Dot-IGS)。此反应可通过银显影液增强,即斑点金银染色法(Dot-IGS/IGSS)。(2)斑点金免疫渗滤测定法(dotimmuno-goldfiltrationassay,DIGFA)此法原理完全同斑点免疫金染色法,只是在硝酸纤维膜下垫有吸水性强的垫料,即为渗滤装置。在加抗原(抗体)后,迅速加抗体(抗原),再加金标记第二抗体,由于有渗滤装置,反应很快,在数分钟内即可显出颜色反应。此方法已成功地应用于人的免疫缺陷病病毒(HIV)的检查和人血清中甲胎蛋白的检测。胶体金的特性是只需要极少的量就能显示出很深的颜色。异丙威快速检测卡原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式。异丙威快速检测卡原理
胶体金法抗原检测试剂盒的基本原理其实就是“抗原-抗体反应”。抗原和抗体就如同“钥匙和锁”的关系,当机体免疫系统识别出病毒抗原后产生抗体,抗体进一步与病毒抗原发生特异性结合,并且这种特异性结合在体外也能发生,这就为研制抗原检测试剂盒增加了“可行性”。免疫胶体金技术并不是个新产物,从上世纪七十年代发展至今已经非常成熟。如生活中常见的早早孕试纸,就是利用了这一技术,通过检测尿液中的人绒毛膜促性素来判断是否怀孕。以上就是相关胶体金检测卡的介绍。异丙威快速检测卡原理
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