细胞增殖分析是细胞生长和分化研究的关键,在药物开发阶段常用来评估化学药物的毒性和对细胞生长的控制作用。经过之后的细胞分裂阶段,各个子代细胞会从母细胞中接收到大约一半的荧光染料。采用流式细胞仪对荧光强度进行分析,即可测定出自标记结合起,单个细胞或细胞群所经历的传代数目。通常根据平均DNA含量或细胞代谢参数进行细胞增殖检测,此类分析可以报告出总细胞数目和活细胞数目,或者测定出单个细胞内的DNA合成情况。细胞增殖染料稀释分析主要基于细胞膜通透性,荧光团分子、染料进入细胞后,将会共价结合到蛋白质上的氨基基团上,从而使染料能够长时间停留在细胞中。使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。福建哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。江苏哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒厂家EdU细胞增殖检测试剂盒的作用是什么?上海东寰告诉您。
EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留
可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定(BrdUbased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI(荧光法)或KitII(AP)可使用试剂盒提供的BrdU单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。EdU细胞增殖检测试剂盒的基本结构级应用。
羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂,经过10mM羟基脲提0min处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iTAdditiveSolution请根据每次用量适当分装后-20℃保存,避免反复冻融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物质析出为正常现象,请上下颠倒几次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色,则说明有效成分降解,不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液,以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时,维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU,请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处?上海咨询EdU细胞增殖检测试剂盒购买
EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方?福建哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。体内外均可进行标记,且可同时使用其他标记进行检测,操作安全简便。适用于贴壁或悬浮细胞,冰冻或福尔马林包埋组织切片。EdU与BrdU检测法不同,EdU-Click检测,如EdU-Click594(BCK-EDU594)无需进行DNA变性来检测掺入的EdU,而是通过一次快速、高度特异性的点击反应,将EdU高效地掺入到新合成的DNA之中,通过EdU与不同荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,从而确地反映细胞的增殖情况。这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案,准确且兼容各种抗体实验方案,整个实验可在30分钟内完成,在结果的数据丰富程度方面,堪比多重分析方法。福建哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照...
【详情】EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散...
【详情】现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也...
【详情】建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照...
【详情】为了与其他荧光共同使用,东寰生物提供多种染料供选择,覆盖常用检测通道,方便您轻松选择适合的染料,比较...
【详情】细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎...
【详情】该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育...
【详情】EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化...
【详情】EdU细胞增殖方法简单,方便,无需DNA变性,能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特...
【详情】EdU细胞增殖检测试剂盒稳定:适用于对细胞增殖状况的连续观察●经济:无需裂解细胞,细胞可继续培养或用...
【详情】传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤...
【详情】保存条件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。...
【详情】