EdU细胞増殖检测试剂盒(红色荧光)使用说明产品简介细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物，其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。试剂盒组分产品编号试剂浓度试剂量保存条件EdU溶液1000X40ul室温运输，4℃长期储存，勿冻存。使用EdU细胞增殖检测试剂盒到底有什么好处？河南正规EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
荧光试剂请避光保存。反应缓冲液10X1ml催化剂溶液25x400ulTAMRA红色荧光溶液400x25ul缓冲添加剂粉末200mgHoechstX20ul使用前须知该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。实验步骤(以24孔板，HK2贴壁细胞为例)EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。浙江哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒原理EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。
羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂，经过10mM羟基脲提0min处理的细胞，绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失，因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iT Additive Solution请根据每次用量适当分装后-20℃保存，避免反复冻融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物质析出为正常现象，请上下颠倒几次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色，则说明有效成分降解，不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液，以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时，维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU，请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。
以及酶或荧光偶联二抗，检测单细胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通过免疫荧光检测，后者通过荧光显微镜检测。优点是：使用核酸酶变性DNA，在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。体内外均可进行标记，且可同时使用其他标记进行检测，操作安全简便。适用于贴壁或悬浮细胞，冰冻或福尔马林包埋组织切片。EdU与BrdU检测法不同，EdU-Click检测，如EdU-Click594（BCK-EDU594）无需进行DNA变性来检测掺入的EdU，而是通过一次快速、高度特异性的点击反应，将EdU高效地掺入到新合成的DNA之中,通过EdU与不同荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性，从而确地反映细胞的增殖情况。这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案，准确且兼容各种抗体实验方案，整个实验可在30分钟内完成，在结果的数据丰富程度方面，堪比多重分析方法。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势如何？
传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法需要DNA变性，抗原修复，抗原抗体过夜孵育，操作步骤复杂繁琐。并且由于BrdU抗体分子较大，嵌入DNA分子中的BrdU无法直接与BrdU抗体结合，必须先进行DNA变性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但变性的程度可能导致错误结果。如果变性不充分，会导致BrdU难以暴露，无法检测，而且变性过程从边缘向中间渗透，会导致细胞核DNA的变性不均匀，边缘模糊不清。如果变性过分，则会导致DNA断裂，甚至降解，导致核染不均一。另外，不同抗体试剂公司的抗体质量不一致，造成难以确保实验重复性，且容易产生假阳性结果。EdU细胞增殖检测试剂盒在社会上的重要性。河南如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买
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与BrdU检测方法相比，EdU检测方法用量小得多，十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果，而且小分子化学反应检测方法反应快，效率高，反应时间需几分钟，不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育，能够更好地保护细胞形态，更简单、更灵敏、更快速、更准确。EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物，分子量很小，在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中，并渗入正在复制的DNA分子，通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。河南正规EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察；如果条件限制，请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照...
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【详情】保存条件：-20℃保存，一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。...
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