总RNA提取试剂是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验。是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验RNA提取试剂注意事项:需自备氯仿,异丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。厦门RNA提取试剂单价
拭子RNA提取试剂的选择?拭子样本的量与提取的核酸量成正比,如果要提高核酸得率,也可通过增加样本量来实现。一般先取一根拭子的涮洗液样本,然后进行提取,如结果不理想可考虑增加样本量或重新采样。但如果增加样本量或重新采样还不能得到满意结果,应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的拭子核酸提取试剂有Q、Biog等。根据我们的经验,Q和T品牌试剂盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部来回刮擦10次)在0.5-3.5ug。同样处理的口咽拭子,Biog试剂盒的提取得率在1-4ug,基本上都能满足下游PCR相关实验的要求厦门RNA提取试剂单价血浆/血清RNA提取试剂盒:该试剂盒中的裂解液P1及柱结合液P2具有高效裂解及提取效果。
动物细胞RNA提取:1、悬浮细胞:可直接离心后弃掉培养基,用无菌PBS清洗1~2遍后,再用适量PBS悬浮起来,然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后,往沉淀细胞里直接加入裂解液,这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧,从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触,从而导致细胞裂解不彻底,降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞:弃掉培养基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿,把细胞吹下来,转移到无RNA酶的EP管中,加裂解液进行提取。
RNA可分为:mRNA:在蛋白分子合成过程中,作为“信使”分子,将基因组DNA的遗传信息(即碱基排列顺序)传递至核糖体,使核糖体能够以其碱基排列顺序掺入互补配对的tRNA分子,进而合成正确的肽链,实现遗传信息向蛋白质分子的转化。tRNA:把氨基酸搬运到核糖体上,tRNA能根据mRNA的遗传密码,依次准确地将它携带的氨基酸,掺入正在合成的肽链中,实现肽链的延伸。与正在进行翻译的mRNA结合,而后rRNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子。rRNA:一般与核糖体蛋白质结合在一起,形成核糖体。植物花总RNA提取试剂盒:特殊的提取缓冲液保证特殊植物材料中的总RNA充分溶解。
RNA提取注意事项:1、组织样本要尽可能的新鲜,避免反复冻融。2、提取时组织要充分研磨,组织量不宜过少,更不宜过多。3、加入裂解液后应给予充分的孵育时间,使样本充分裂解。4、在用Trizol法提取时,分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸,不能多吸”,千万不能提取到中间层,否则会导致严重的基因组DNA污染。5、洗涤时洗涤液应充分浸润到管壁的四周,确保洗涤彻底。6、柱式提取法,洗涤完后除了对柱子进行空离后,还应当将吸附柱置于超净台内吹风5~10min,使有机溶剂充分挥发干。7、柱式法较后洗脱时候,当加入DEPC水后还应孵育3~5min,或者提前将DEPC水加热至60℃,可提高洗脱得率。传统的Trizol裂解异丙醇沉淀法较后RNA是用DEPC水溶解沉淀,则应当给予适当溶解时间,并用泵头不断吹吸离心管底部。细胞质和细胞核RNA提取试剂盒特点:试剂盒可用于哺乳动物细胞或者组织样品的提取。厦门RNA提取试剂单价
RNA提取试剂注意事项:溶液需用DEPC水配制。厦门RNA提取试剂单价
植物RNA快速提取试剂盒:是一种单相RNA快速提取试剂盒,可高效裂解坚固的植物细胞并强烈压制RNA酶活性。细胞破碎之后,植物多糖立即被PlantRNAtrip独特的成分结合。离心抽提步骤将RNA与灭活的RNA酶、蛋白、基因组DNA污染分离,并清理植物多糖多酚以及次生代谢产物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理残余的多糖。提取可在60分钟内完成,所提取的RNA纯度极高,不含DNA和多糖和多酚污染,可用于构建cDNA文库、RT-PCR、Northern转印分析、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译、和RNA酶保护实验。厦门RNA提取试剂单价
与DNA不同,RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构,但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了A-U、G-C配对外,G-U也可以配对。在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。许多样品中含有高水平的 RNase,这种酶也会加速 RNA 的降解。...