南京牛血清培养基

为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀？如何避免该现象？在2~8°C条件下存放，血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀，如血纤蛋白（fibrin），单体时处于溶解状态，在冻融过程中会发生聚集，形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟，取上清，然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径，一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞，建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象，建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱，避免反复冻融和融化后的血清在2~8°C条件下长时间放置。血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸，蛋白质，维生素（特别是脂溶性维生素如A，D，E，K）。南京牛血清培养基

蛋白激酶是酶类这个家族中比较庞大的一员，被用来完成蛋白磷酸化作用的催化，这是控制细胞生命活动中比较通常的机制。其中相当有有效性的蛋白激酶之一可能就是CK2。蛋白激酶CK2（protein kinase CK2, PKCK2），过去曾经被称为酪蛋白激酶-2或Ⅱ（cascin kinase2 or Ⅱ）。它是由两个催化亚基（aa’）和两个调节亚基（ββ）构成的不均一四聚体。蛋白激酶CK2是由两个分别为42—44KDa和38KDa的aa’ββ型异四聚体结构。该结构很稳定,在体外只有在变性的条件下才能被解离。除了细胞基质,一些病毒蛋白也被CK2所磷酸化。蛋白激酶CK2在转录、信号、增殖，并且在导致发生的各细胞步骤中发挥作用。济南新生牛血清夏天在常温下即可,冬天要在20-30℃下静置30-45分钟。

★ 我们需要知道都有哪些种类的牛血清和它们的用途：1透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。2碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质，如某些、细胞因子、生长因子等，去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证的作用效果。3去外泌体血清适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。4低IgG血清用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。

组份与比例不同胎牛血清和新生牛血清两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组份与比例不同。03用途与用法不同某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，一定不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。采集血液样品后,倾斜30-45度角放置好。

2.取血方式不同胎牛血清：母牛怀孕3-8个月时，采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清：分别是取自新生牛（小牛）、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分比较少；促细胞生长因子、促附因子、及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清4.用途不同某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行，如：干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等；而有些细胞需要小牛血清就可以，如：肿瘤细胞等。使用浓度也不同，一般在10%-15%，有特殊要求的浓度在20%至于某一株细胞适应什么样的血清浓度，还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。南京牛血清培养基

给培养液供应出色的缓冲系统。南京牛血清培养基

配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4°C下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再继续研磨成乳剂，润十水水上10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原剂量，头次剂量为300~500ug，加强免疫的剂量约为头次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂，头次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。在第2次加强免疫后2周，从耳缘静脉取2~3ml血，制备血清，检测抗体效价。如未达到预期效价，需再进行加强免疫，直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时，即可放血制备抗血清。南京牛血清培养基

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