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抗血清的采集与保存家兔是很常用以产生抗体的动物,因此这里主要讨论兔血的收集。羊等较大动物以颈静脉、动脉取血,鼠等小动物取血可参阅有关资料。取兔血有两种方法,一是耳缘静脉或耳动脉放血,一是颈动脉入血,也可心脏采集血。取动脉或静脉放血时,将免放入一个特造的木匣或笼内,耳露于箱(笼) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳缘的毛,用少许二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管扩张、充血。用手轻拉耳尖,以单面剃须刀或尖的手术刀片,快速切开动脉或静脉,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球压迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反复多次放血。颈动脉放血时,将免仰卧,固定于兔台,剪去颈部的毛,切开皮肤,暴露颈动脉,插管,放血。放血过程中要严格按无菌要求进行。收集的血液置于室温下1h左右,凝固后,置4°C下,过夜 (切勿冰冻) 析出血清,离心,4000rpm,10min。在无菌条件,吸出血清,分装 (0.05~0.2ml) ,贮于-40°C以下冰箱,或冻干后贮存于4。C冰箱保存。相同动物细胞代谢进程中有许多物质是动物细胞所必需而本身无法组成的的,例如碱基、氨基酸等微量物质。杭州胎牛血清购买

血清的种类与类型根据培养的细胞类型不同,我们要选择合适的血清类型。常见的血清类型如:特级胎牛血清、胚胎干细胞特用胎牛血清、间充质干细胞特用胎牛血清等,还有新西兰、澳洲来源的胎牛血清。此外,还有一些特殊加工工艺的血清如:四环素调控系统胎牛血清、低IgG胎牛血清、去外泌体胎牛血清、透析胎牛血清、碳吸附胎牛血清、去脂胎牛血清等。血清的解冻条件建议血清的解冻比较好方式为:-20℃冰柜到4℃冰箱融化,充分过夜解冻。不推荐-20℃冰柜到37℃水浴融化,会因温度改变较大,导致蛋白析出,产生大量沉淀。解冻时,可将血清无菌分装至50ml离心管中。辽宁动物血清购买所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。

保存注意事项:血清的保存应该注意以下几点:(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.(2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

马血清一般分为两种:第一种马血清含有的大分子蛋白比较多,适用于蛋白封闭;第二种马血清为细胞培养级别。它经过多次过滤,祛除了许多大分子蛋白,但保留了血清中促细胞生长的活性因子,因而能用于细胞培养,例如神经细胞培养时,培养基中则需要添加马血清。质量的马血清来自健康马血液,为封闭系统内无菌采集血过滤而成,为淡黄色澄清液体,很低内毒类素,无溶血,无异物,无细菌、、支原体、噬菌体等。猪血清,常用于猪肺炎支原体疫苗的生产。在对细胞和活疫苗进行支原体检验中,《兽药典》也明确推荐了猪血清作为支原体检验用液体培养基的组成成分。并且,《兽药典》指出在【猪支原体肺炎微量间接血凝试验】和【猪支气管败血波氏杆菌凝集试验】中需要阴性血清,即质量的猪血清,血源必然来自健康动物。因为血清供体已与环境长期接触,体内免疫系统已经经历了一场又一场的战斗,而保留了抗体、补体等。

颜色不同血清根据血红蛋白含量的不同,表现的颜色也不一样真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂,一般表现出微红色或橘红色;而新生牛(小牛)血清则表现为蜡黄色或偏黄色澄清度和粘稠度不同胎牛血清蛋白和脂类含量低,表现为稀薄、清淡新生牛(小牛)血清相比更加粘稠7.血清选择在这几类血清中,胎牛血清的品质无疑是比较高的,如果你的细胞比较娇贵难养,出现比较好的培养效果请选择胎牛血清;如果你的细胞比较易养,给点什么血清都能出现很好的效果,使用新生牛(小牛)血清就足够了。血清在细胞培养中为细胞提供氨基酸,蛋白质,维生素(特别是脂溶性维生素如A,D,E,K)。广州羊血清厂家直销

巧在人们发现这些成分不耐受高温,所以才有了热灭活处理。杭州胎牛血清购买

不同类型血清比较的报道:2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对MDCK细胞培养效果研究》,研究了进口胎牛血清、国产胎牛血清、国产新生牛血清对MDCK细胞的促生长效果。作者在含10%不同类型牛血清的DMEM培养液中连续传代培养MDCK细胞,比较了三种血清培养MDCK细胞的传代稳定性、比较大増殖密度、倍增时间、比生长速率、贴壁率等指标。结果显示,在比较大增殖密度和倍增时间上,胎牛血清均优于新生牛血清。在贴壁率方面[贴壁率(%)=(所形成集落数/接种细胞数)×100%],进口胎牛血清略高于国产胎牛血清,差异明显;国产新生牛血清低于国产胎牛血清和进口胎牛血清,差异极明显。杭州胎牛血清购买

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