合肥武汉无血清细胞冻存液

无血清细胞冻存液细胞复苏步骤：1.从-80℃取出冻存细胞，立即放入37℃水浴锅快速解冻。2.待细胞混合液彻底解冻融化后，立即加入1ml细胞培养基，混合。3.将混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rpm，5min离心，弃掉上清，获取细胞沉淀。4.加入适量的新鲜细胞培养基，轻柔混匀，并将混合液转移至培养容器，观察细胞状态正常后，进行后续细胞培养工作。注意事项：1.细胞在加入冻存液分装后，应减少在外存放时间，尽快移入到-80℃较低温冰箱。2.对于干细胞（ES细胞）等冻存时，建议在使用前对所冻存的胞进行1周以上的试验性细胞冷冻保存培养，确认性能后再进行正式冻存。3.本款细胞冻存液含有10%DMSO，部分对DMSO敏感的细胞，建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。无血清细胞冻存液用于T淋巴细胞、NK细胞等免疫细胞的存储。合肥武汉无血清细胞冻存液

细胞冻存注意事项：离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。石家庄无血清细胞冻存液推荐厂家无血清冻存液特性：不含动物成分。

细胞冻存的操作步骤：1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；2.取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。3.去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；4.离心1000rpm，5min；5.去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的较终密度为5×106/ml～1×107/ml；6.将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5ml；7.在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；8.冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

无血清细胞冻存液：冻存注意：开盖之前，用70%的乙醇或异丙醇擦拭瓶身。以下说明适用于在6孔板内的培养物的冻存。培养物应该在适合传代的时候进行收集和冻存。每管所含有的细胞应当来源于6孔板的1个培养孔。如果使用其他的培养器皿，请相应的调整体积。1.在室温（15-25°C）以300xg离心5分钟。2.轻轻吸走上清液，注意不要扰动细胞团。3.用血清学吸管以1mL的TBD-698重悬细胞。在打散细胞团时，尽量减少细胞聚集体分解。4.用2mL的血清学吸管将1mL的细胞聚集体转移到标记好的冻存管中。5.用以下方法冻存细胞聚集体:推荐使用缓速降温方法，每分钟降低1度，随后可以在-196°C液氮长期保存。不推荐在-80°C长期保存。逐步降温法：-20°C保存2个小时，然后-80°C中保存2个小时，随后可以在-196°C液氮中长期保存。无血清细胞冻存液的优势：含DMSO、糖类、氨基酸等成分的一款通用型细胞冻存液。

无血清细胞冻存液：产品优势：1.化学成分明确，无任何外源蛋白和血清，适用于各类动物细胞株冻存。2.无需程序降温，细胞复苏率90%以上。3.冻存细胞可直接存放于-80℃冰箱，稳定保存数年。4.即用型产品，4℃可稳定保存。细胞冻存：1.收集融合率>90%的对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于离心管中。2.1000rmp离心5分钟，去除离心管中的上清液，收集细胞沉淀。3.加入适量细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为1x106～1x107cells/mL。头轻柔吹打混匀,Z成细胞悬液。4.将离心管中的细胞悬液分装与细胞冻存管中，每管1mL或1.5mL。5.将分装好的细胞直接冻存于-80℃冰箱中，可稳定冻存数年。6.如若长期保存，可在次日转移至液氮中。无血清细胞冻存液可用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。合肥正规无血清细胞冻存液厂家供应

无血清细胞冻存液产品特色：不含动物源成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低。合肥武汉无血清细胞冻存液

无血清快速细胞冻存液细胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。7.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。合肥武汉无血清细胞冻存液