RNA指的是核糖核酸。真核生物体的遗传物质存在于细胞核内,多数的真核生物使用DNA也就是脱氧核糖核酸来作为遗传的中心物质,但是少量的病菌遗传物质可以是RNA。正因为病菌的遗传物质是RNA,所以可以通过检测病菌的RNA是否存在,或者其浓度和含量来判断是否存在相应的病菌传染,传染的程度及病菌是否仍在大量复制。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的缩写。存在于生物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上,同时使污染物通过柱被有效地洗去。RNA提取试剂注意事项:使用冻存的细胞或组织抽提总RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。济南正规RNA提取试剂哪家好
rRNA是细胞内的一种基本RNA,与r蛋白一起构成蛋白质合成的场所—核糖体。随着rRNA基因序列越来越了解,其在生物研究中也的得到了更普遍的应用,主要表现在生物进化研究和分子流行病研究。(1)rRNA在生物进化上的研究。rRNA具有高度保守性,且普遍存在于各种生物中,rRNA提供了足够的序列信息。现在还可用于在细菌分类、细菌鉴定等方面。(2)rRNA在分子流行病上的研究。目前,人们已经把rRNA在进化上的普遍差异应用到了流行病学研究方面,通过对不同细菌进行鉴定分类,从而明确病因,追踪传染源,进一步控制及预防疾病。无锡开封RNA提取试剂试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料。
RNA提取:预备工作(1)塑料制品:尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品,如没有开封使用过,通常不必再处理。处理的步骤如下:O在玻璃烧杯中注入去离子水,加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物,须在通风橱中小心使用)O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中,将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口,高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥,置洁净处备用。(2)玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。
动物组织总RNA提取:1、尽量选取新鲜的组织,如果不是新鲜的(较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时,不要拿到室温直接剪取,一定要放到冰盒上,尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织,剪取样本时尽量剪组织中心的部位,或者先将大块的组织先从中间切开,然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎,将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中,加入裂解液,剪碎的组织要充分接触裂解液,准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小(30~60mg)的组织进行匀浆,如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等,适当增减剪取组织的量(可选10~20mg)。4、如果提取的是鱼肌肉,虾肉,海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量(推荐100~200mg)。5、条件允许的情况下,动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤,如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上,以减少RNA的降解。血浆/血清RNA提取试剂盒:利用吸附柱法从血清、血浆样品中简单快捷提取高纯度高质量的miRNA。
RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量血浆/血清RNA提取试剂盒:总RNA吸附柱保证RNA提取速度快,提取效率高。太原正规RNA提取试剂单价
植物花总RNA提取试剂盒:效去除植物花组织中的多糖、多酚类等杂质。济南正规RNA提取试剂哪家好
RNA是核糖核酸,是存在于生物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA是由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成的长链状分子。一个核糖核苷酸分子则由磷酸,核糖和碱基构成。在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板;tRNA是mRNA上遗传密码的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的机械。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,可调节基因表达。而其他如I、II型内含子、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶。济南正规RNA提取试剂哪家好
将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脱液,室温放置1~2分钟。12000rmp室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法:将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rmp室温离心半分钟,弃穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室温12000rmp离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。室温12000rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响R...