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医院检验中心糖原染色操作规程：1．雪夫氏试剂：400m1蒸馏水煮沸除去C02，逐渐加碱性品红2．08溶解后，待冷却至60℃，加1mm01儿HCl40ml，再加偏重亚硫酸钠(NaHSO：)4g，次日加活性碳1．5g，放置半天后过滤。配好后液体为无色透明，保存于4℃冰箱中。2．过碘酸作用液：过碘酸1g溶于蒸馏水100ml中，或取过碘酸钾(1tI04)0。698加蒸馏水100ml，微加热使溶解，再加浓硝酸0．3m1，置冰箱中保存。3．固定液：95％乙醇90ml与甲醛10m1混匀。4．20g/l甲基绿：甲基绿2g溶于100m1蒸馏水。[操作]_x005f_x000c_(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内10分钟。(2)水洗数次后，对照片先用唾液消化30分钟，也可在同一片，在其中间用蜡笔划界，一半做对照，另一半做测定。(3)水洗后，滴加过碘酸数滴于涂片上，作用10分钟后，再水洗数次。遇醋酸发生沉淀，胃粘蛋白则除外。天津品质好的糖原染色试剂盒量大从优

注意事项：染色时：①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中，前一个染液浸染完成后，在进行下一个染液的步骤之前，必须彻底充分水洗，使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③ 每次滴加染液前，务必吸干组织上多余的水分，避免多余的水把染液稀释了，造成染色不佳。④在滴加染液时，务必使染液完全覆盖组织，但不能溢出圈外，避免浪费试剂。在染色时，用有色铅笔在组织周围划一个圈，这样在滴加染液时就不会使染液溢出山东正规糖原染色试剂盒生产厂家本试剂盒适用于骨髓细胞涂片，血液细胞涂片。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。

可以通过pas染色计算糖原含量吗：PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质.具体现象例举：阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色；PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色.巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色.颜色深浅与浓度相关~在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸。

糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化，产生醛基，与雪夫（Schiff）试剂中无色品红结合，形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫（PAS）反应。（1）雪夫液配制：碱性品红1g溶于200ml沸水中，冷却60℃时过滤，加1mmol/L盐酸20ml，再冷却至25℃左右，加偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗处24h，无色即可放冰箱中保存，呈微红色，则加活性炭1～2g，吸附过滤使成无色液体，放冰箱中保存。若溶液变红，即不能再用。（2）10g/L过碘酸水溶液：过碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用，一般可用3个月，变黄则失效细胞核、染色体以及基因表达的研究。江西口碑好的糖原染色试剂盒生产厂家

该依据切片厚薄、组织的类别等决定。天津品质好的糖原染色试剂盒量大从优

PAS染色的临床意义：1.红细胞系统：①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比增高，阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血）以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时，幼红细胞为阴性反应，有时*个别幼红细胞呈阳性反应天津品质好的糖原染色试剂盒量大从优