郑州正规鼠尾胶原厂家

鼠尾胶原蛋白等实验技术应用：干细胞、血管内皮细胞等多种「难伺候」的细胞，以及一些组织在体外培养时，需要在模拟体内环境的细胞外基质中生长，胶原蛋白和纤粘蛋白正是细胞外基质的主要组成部分，富含1型胶原蛋白大鼠尾部也成了实验室用胶原蛋白的较主要来源。鼠尾取血剪下几毫米小鼠尾巴、在小鼠尾静脉上划一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到这种鲜红的。它可以用于监测小鼠血液成分的变化，确认小鼠是否患上了糖尿病或者某些治好能够改变小鼠的血糖等。比起心脏和眼部取血，实验用鼠尾尖取血的取血量较小，但取血之后，小鼠还能继续下一步建模或者实验，完全没有性命之忧。制备鼠尾胶原：将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。郑州正规鼠尾胶原厂家

详细步骤如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段（3cm左右），抽出银色的尾键；3.把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；4.48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；5.分装上清（鼠尾胶）4度（或-20度）保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。在使用时，先将冰存的胶原液在室温下解冻，再按以下步骤包被培养器皿：1）用吸管吸取胶原液，在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2）若包被的是培养瓶，可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后，即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话，可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内，将浸有氨水的棉球放入饭盒内，盖紧饭盒盖，四周用封口胶封死。金华鼠尾胶原平均价格探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。

具体实施方式实施例1止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为0.2%0.2%。余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养小板，-40°C预冻池，再转入_80°C超低温冰箱急冻4h，再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥10h，即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌，干燥保存。冻干的材料可直接用于各种伤口的止血。实施例2止血材料的制备1、选择能与鼠尾胶原蛋白联合发挥作用的聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料。各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5%2%1%，余量为水。2、将混合材料用无菌水溶解后浇入培养板，-20°C预冻，再转入_80°C超低温冰箱急冻8h，再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4°C下冷冻干燥30h，即可以得到复合型冻干止血材料。Co60辐射灭菌，干燥保存。

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2诱导。24h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料，从而破坏分子间的盐键和希夫碱。

鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上， pH 左右时可形成具有一定强度三维胶。太原鼠尾胶原进货价

鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便。郑州正规鼠尾胶原厂家

含细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。加入760μL的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存，切勿冻存，有效期一年。郑州正规鼠尾胶原厂家