杀灭曲线的建立：通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线），确定能够杀死未转染宿主细胞的较低浓度，从而筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。建立杀灭曲线至少选择5个浓度。1、按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上，37℃，CO2过夜培养（需要更高密度，可增加接种量）。2、根据细胞类型，设定合适的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基，每个浓度做三个平行孔。4、接下来每3-4天更换新的含药物培养基。5、按照每2天进行活细胞计数，来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。通常7-10天内能够杀死绝大多数细胞的较低浓度为筛选用的工作浓度。BMC原代分离步骤：小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层，尽量全部吸出单个核细胞。黑色标本保色液
pH缓冲溶液的效能指标：pH缓冲溶液抵抗外加强酸、强碱的能力可以用缓冲容量β来表示，缓冲容量的意义是，使1L缓冲溶液的pH增大1个单位时需加入的强碱（NaOH）的物质的量（mol），或减小1个pH单位时时需加入的强酸（HCl）的物质的量，显然β越大，缓冲外加强酸强碱的能力就越大。β与pH、总浓度C及共轭弱酸碱的浓度比有关。式中的C为弱酸+弱酸盐（或弱碱+弱碱盐）的总浓度，显然，总浓度越大，缓冲能力就越大。式中的两个δ分别为弱酸HA、弱酸根A-（又称共轭碱）的分布分数值，δ定义为其平衡浓度与总浓度之比（我以前在论坛中曾作过介绍），它们也是pH值的函数。数据学上可以证明：恒定C时，当两个分布分数值均等于0.5时，缓冲容量较大，其实用意义是：选择缓冲溶液体系时，应该选弱酸与弱酸盐的浓度比接近1，而pH值仍能满足配制要求的体系，对于弱碱及弱碱盐溶液，也有同样的要求。柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(0.1mol/L,pH3.0-6.6)检测试剂盒洗刷次数越多，布景越低。
检测试剂盒样品收集: 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。如果您的样品中检测物浓度高于标准品高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先做预实验，以确定稀释倍数）。
试剂盒的原理：根底是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号。结合在固相载体外表的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶符号的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体外表的抗原或抗体起反响。用洗刷的办法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分隔。再参加酶符号的抗原或抗体，也通过反响而结合在固相载体上。此刻固相上的酶量与标本中受检物质的量呈必定的份额。参加酶反响的底物后，底物被酶催化成为有色产品，产品的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。pH缓冲溶液有何用途：pH测量前标定校准pH计。
标准物质RM（reference material）是具有准确量值的测量标准，是具有一种或多种足够均匀并已确定特性值的，用于校准设备、评价测量方法或给材料赋值的材料或物质。应用于化学测量、生物测量、工程测量、无力测量等领域。有证标准物质CRM（certified reference material）是附有证书的标准物质，用建立了溯源性的程序来确定其一种或多种特性值，使之可溯源到准确复现的用于表示该特性值的计量单位，而且每个标准值都附有给定置信水平的不确定度。其证书是介绍标准物质的技术文件，是研制者/生产者向用户提出的质量保证。证书给出了标准物质的标准值及其准确度，扼要的描述标准物质的制备程序、均匀性、稳定性、特性量值及其测量方法，介绍标准物质的正确使用方法、储存方法。所有的化学分析，定性定量，都依赖于，并且后，可溯源至一种有证标准物质或某种类型的标准物质。检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用。二苯胺磺酸钠指示剂
BMC原代分离步骤：抽取人的外周血于肝素抗凝管中，取足5mL新鲜血液。黑色标本保色液
液体固体试剂正确取用试剂的方法过程：如需少量液体试剂则可用滴管取用，取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。为了达到准确的实验结果，取用试剂时应遵守以下规则，以保证试剂不受污染和不变质：试剂不能与手接触。要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，方可取用另一种试剂。试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处。已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。黑色标本保色液
