高效液相色谱法具有哪些优点?1.高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。2.高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。3.高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到好的分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。4.高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。5.应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。6.柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物7.样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。 上海人禾电子科技有限公司专业供应二手液相色谱仪,欢迎来电。宁波回收二手液相色谱联系方式
忽略了溶剂混合所带来的粘度变化:混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。关于六通阀的正确使用和维护:①样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。②转动阀芯时不能太慢,更不能停留在中间位置,否则流动相受阻,使泵内压力剧增,甚至超过泵的最大压力;再转到进样位时,过高的压力将使柱头损坏。③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水冲洗。南京卖二手液相色谱上海人禾专业提供二手液相色谱,欢迎来电。
反冲色谱柱:一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。预柱和保护柱:选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的,使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代.发展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高压输液泵和自动记录的检测器,克服了经典液相色谱的缺点,发展成高效液相色谱,也称为高压液相色谱。液相色谱按其分离机理,可分为四种类型:吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法。 上海人禾专业提供二手液相色谱,欢迎来电洽谈。
示差折光检测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的。光从一种介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射。只要样品组分与流动相的折光指数不同,就可被检测,二者相差愈大,灵敏度愈高,在一定浓度范围内检测器的输出与溶质浓度成正比。缺点是不能做梯度实验,比较大的池耐压是100psi,流速范围是0.3-10ml/min。荧光检测器是高压液相色谱仪常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分,当试样组分具有荧光性能时,即可检出。其特点是选择性高,只对荧光物质有响应;灵敏度也高,最低检出限可达10-12g/ml,适合于多环芳烃及各种荧光物质的痕量分析。也可用于检测不发荧光但经化学反应后可发荧光的物质。如在酚类分析中,多数酚类不发荧光,为此先经处理使其变为荧光物质,而后进行分析。荧光检测器滤光片可以分为近通(Shortpass)-低于特定点的所有波长可以通过,远通(Longpass)-高于特定点的所有波长可以通过,带通(Bandpass)-在特定范围内的所有波长可以通过。上海人禾电子科技有限公司专业供应二手液相色谱仪,欢迎来电洽谈。宁波赛默飞二手液相色谱仪租赁
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对液相色谱仪的要求:长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。C18柱不能进蛋白样品,血样、生物样品。堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗,清洗方法:以异丙醇作溶剂冲洗;放在异丙醇中间用超声波清洗;用10%稀硝酸清洗;气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。宁波回收二手液相色谱联系方式