液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。1906年俄国植物学家茨维特(M.S.Tswett)将植物色素提取液加到装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部,继而以石油醚淋洗柱子,结果使不同的色素在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带,每个色带表示不同的色素。从此,这类方法均称为色谱法。随着色谱技术的发展,色谱法不仅可以用于分离有色物质,而且广为地运用于分离无色物质,尤其是有机化合物。液相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果,而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时,定性鉴定就很困难,这时需借助质谱、红外和化学法等配合。另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。此缺点可高效液相色谱法来克服。二手液相色谱仪是一种常见的实验室仪器,通常用于分离和分析化合物。有需求请找上海人禾。重庆现货二手液相色谱哪家好
常见故障断定及解决方法:保留时间变化:1.柱温变化:柱恒温,必要时需配置恒温箱;2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;3.缓冲液容量不够:用》25mmol/L的缓冲液;4.柱污染:每天冲洗柱;5.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相;6.柱快达到寿命:采用保护柱。保留时间缩短:1.流速增加:检查泵,重新设定流速;2.样品超载:降低样品量;3.键合相流失:流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向;4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀;5.温度增加:柱恒温。AB Sciex二手液相色谱耗材二手液相色谱仪的使用便捷,可提供可靠的分析结果。有需求请找上海人禾。
高压泵的保养:泵是液相色谱的重心,泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中,并要在高压下保持流量和压力的稳定。状态正常的高压泵是液相色谱准确分析的基础,所以平日一定要重视对泵的维护。泵压力波动很多情况下,泵的问题反映在压力上,压力波动又是较常见的一类问题。泵正常的压力波动通常会在2%以内,且平稳规律;不正常的波动通常由气泡和盐造成。如果流动相中的气泡没有被脱气机除掉而到了泵以后,就会造成压力波动,通常我们可以通过重新清洗(purge)流路和再次脱气流动相加以解决。由盐造成的波动主要是因为流动相中加入了浓度较高的缓冲盐,在含盐流动相与有机相混合的时候,盐会有微小的析出,从而导致压力异常波动,解决这类问题可以考虑适当降低盐的浓度,或者使用甲醇取代乙腈有机相。如果一定要用到此类流动相,可以考虑在有机相中加入一定比例的水,然后适当提高梯度结束的终点。
对液相色谱仪的要求:1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。二手液相色谱仪的使用需要注意设备的存储和保管,以免损坏和丢失。有需求请找上海人禾。
忽略了溶剂混合所带来的粘度变化:混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。关于六通阀的正确使用和维护:①样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。②转动阀芯时不能太慢,更不能停留在中间位置,否则流动相受阻,使泵内压力剧增,甚至超过泵的最大压力;再转到进样位时,过高的压力将使柱头损坏。③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水冲洗。二手液相色谱仪的使用需要注意设备的校准和调试,以确保分析结果的准确性和可靠性。有需求请找上海人禾。珠海常用二手液相色谱联系方式
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进样系统:一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。输液系统:该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质都能获得有效分离。重庆现货二手液相色谱哪家好
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