fluidlabr-300使用全息显微技术和机器学习算法获得准确可靠的细胞计数
介绍方法
细胞样品制备hela细胞在DMEM中培养,通过胰蛋白酶化从瓶的表面分离。为了在细胞计数验证过程中尽量减少样品的变异,HeLa细胞以~106细胞/mL的浓度在冰冻培养基(10%DMSO,20%FBS,DMEM细胞培养基)中小等分冷冻,并在-20°C保存。
同样,酵母细胞(酿酒酵母菌)在酵母培养基(NaCI•蛋白胨缓冲液和蔗糖)中,在20℃下生长2天,以~107个细胞/mL的浓度在15%甘油(v/v)的水中小等份冻存在-20℃。 fluidlab R-300便携式细胞计数仪/光谱仪上海代理商?青海fluidlabR-300便携式细胞计数仪调试
论述
来自异源系统(如大肠杆菌)的蛋白质表达是许多研究领域的重要工具。在这里,我们阐述了fluidlabR-300对于P450酶表达质量评估是如何完成的。使用该工具和标准化学物质可以评估到所产生的酶的纯度和血红素掺入程度只有23%。我们可以得出结论,三组数据极为接近。首先,所表达的P450氧化还原酶*为Bradford试验测定的肽总库的一小部分,该部分可以使用SDS-PAGE或甚至质谱分析来测定。其次,细胞裂解物未经离心产生高杂质,光谱中可以看见在实际含血红素部分附近有一个近紫外峰。细菌细胞对FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的摄取可能需要监测或至少改变,以通过将酶转移到所需的小部分来改善血红素的掺入。监测也可以通过光谱法进行,使用例如铁锌作为比色测定的螯合剂。总体而言,本次质量评估的所有步骤都是通过手持设备完成的,这使得例如在生产环境中的质量控制直接可行,而无需将任何方法转移到另一个分析系统。 重庆优势fluidlabR-300便携式细胞计数仪报价表使用细胞计数仪的注意事项。
细胞计数仪
通过全息显微镜进行无标记的生存力测量具有高统计显着性的大视场所需样本量小(4-20µl)
光谱仪
从375到700nm记录的全光谱图无需维护和重新校准便携式和小型
fluidlabR-300使用数字全息显微镜(DHM)的无标记技术直接在细胞培养环境中分析细胞数量和活力。与明场显微镜相反,DHM不使用光学透镜,而是生成所谓的细胞“全息图”,由计算机进行分析。
生长曲线
接种过夜预培养物后,在37°C、持续振荡90小时的条件下监测大肠杆菌生长曲线。使用fluidlab的适配器3和600nm的固定波长。从预实验中表明,线性相位从0.3开始,因此此时可以用IPTG进行诱导。
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在每次测试之前,冻存的海拉细胞和酵母细胞被快速解冻,用PBS洗涤,并离心。丢弃上清液,将细胞重悬于少量HeLa或酵母细胞培养基中,HeLa的浓度为~107细胞/mL,酵母细胞为~108细胞/mL。标称细胞浓度是通过血细胞计人工计数细胞量并使用细胞培养基配备稀释液而得来的。
验证实验中使用的人体外周血单核细胞(PBMC)样本是通过Ficoll-Paque密度离心法从健康捐献者的白膜层中分离出来的,以确保从样本中去除红细胞(RBCs)。将细胞重悬在少量PBS中,以产生约107个细胞/mL的浓度。为了保证细胞活力,样品在4°C保存,直到当天测试时(离心分离后不超过6小时)。 上海R-300便携式OD600菌液浓度测定仪?
fluidlab R-300细胞计数的准确性和精确性
在这里,我们比较了人工计数、fluidlab R-300和竞品获得的三种不同细胞类型和浓度的细胞计数。所获得的所有数据汇总在图3中。fluidlab R-300细胞计数的准确性在105 ~ 107细胞/mL浓度范围内可与人工计数相媲美。在较低的浓度下,准确性不同于人工计数,但与竞品相当。这可能与当视野中检测到的细胞较少时统计数字不好有关。随着细胞浓度的增加,在分析中包含了更多的细胞,误差减小。对于大多数被检测的细胞类型和浓度,fluidlab R-300细胞计数是非常精确的(如图3中的小误差线所示)。总的来说,fluidlab R-300在大范围的细胞类型和浓度上提供了精确和准确的细胞计数结果,每个样本不到30秒。 fluidlabR-300便携式细胞计数仪的参数。甘肃专注fluidlabR-300便携式细胞计数仪推荐厂家
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光谱仪的能力如何?
我们的光谱仪在 0 - 2.5 的值范围内呈线性,光度精度为 0.01 或 1 %。可以在 375 nm 和 700 nm 之间捕获光谱,光谱分辨率小于 2 nm。更多信息可以在光谱仪的性能报告中找到。
细胞计数仪的功能如何?
我们的细胞计数仪与手动方法(Neubauer 室)和已建立的自动细胞计数仪均显示出高度相关性(准确度为 99%,确定系数 R²=0.9956)。
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上海怡赛科学仪器有限公司是一家集生产科研、加工、销售为一体的****,公司成立于2014-07-08,位于沪松公路2299号苏式商务大楼409室。公司诚实守信,真诚为客户提供服务。公司主要经营大龙,洗瓶机,厌氧工作站,旋光仪等产品,我们依托高素质的技术人员和销售队伍,本着诚信经营、理解客户需求为经营原则,公司通过良好的信誉和周到的售前、售后服务,赢得用户的信赖和支持。公司会针对不同客户的要求,不断研发和开发适合市场需求、客户需求的产品。公司产品应用领域广,实用性强,得到大龙,洗瓶机,厌氧工作站,旋光仪客户支持和信赖。怡赛秉承着诚信服务、产品求新的经营原则,对于员工素质有严格的把控和要求,为大龙,洗瓶机,厌氧工作站,旋光仪行业用户提供完善的售前和售后服务。