德国anvajofluidlabR-300便携式OD600测定仪
血红素掺入的分光光度法观察
上清液在421nm处显示典型最大值,以及575nm和600nm处的两个小峰,可能属于碎片、血红素功能的误掺入或其他掺入的金属离子(图4)。
图4:光谱法观察血红素吸收
血红素占用率的评估
从早期的实验中,已知血红素部分的摩尔消光系数,因此可以确定摩尔比。
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德国anvajofluidlabR-300便携式OD600细菌细胞浓度测定仪
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fluidlabR-300细菌生长和蛋白质含量的测定
材料和方法
用pLEMO质粒转化Lemo21大肠杆菌细胞,该质粒含有用于阴性选择的氯霉素抗性盒以及由上游LacOperon控制的目的蛋白的基因。我们选择了细胞色素P450酶作为模型酶,因为这些酶对芳香化合物的羟基化具有有趣的催化作用。为了获得充分的表达,将FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸添加到LB生长培养基中,以确保血红素基团的正确结合,从而形成全息复合物。
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可以在不染色的情况下测量活力吗?
使用 fluidlab R-300 免染色进行活力测定。消除了细胞毒性作用并减少了预分析步骤。这在预分析期间节省了宝贵的时间,增加了细胞的稳定性并避免了与有害染色材料的接触。死细胞和活细胞的区分基于我们识别细胞折射率的创新光学技术
可以使用哪些样本载体?
凭借灵活的适配器系统,fluidlabR-300支持用于分光光度测量的标准比色皿和用于自动细胞计数和免染色活力测定的不同规格的玻璃样品载体。。可在我们的产品视频中找到可行性应用的充分可视化。
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介绍
蛋白质功能和性能的生化分析是工业应用领域基本的研究步骤之一,例如酶的工业用途,这些酶用于降低工业过程的能耗或促进极其复杂的化学修饰。因此,在细菌细胞培养物中重组表达蛋白质是一项重要的实验室任务,这使得用户能够大量生产设计的酶。这里我们展示了fluidlabR-300的用途,帮助用户能够通过使用我们的手持设备来执行表达系统质量控制。包括通过OD600杂散光精确评估细菌生长曲线,以及通过Bradford试剂进行蛋白产量的比色测定。fluidlabR-300可以很容易地一方面在筛选实验中设置标准参数,另一方面在生产现场直接使用确定的参数,而不需要另一个方法转移步骤。 德国进口anvajo fluidlab R-300便携式光谱仪。
fluidlabR-300可以成功地用于细胞类型的自动细胞计数,包括异质样品和小细胞,如PBMCs和酵母细胞。fluidlabR-300在浓度范围内的结果是准确的,精确的,高度可重复的,这是其在各种应用,如监测细胞增殖,细胞培养维持和生物工艺的根本前提。简单-细胞计数无需染色快速-30秒内出结果方便-可分析***的细胞类型小巧-随时随地进行细胞分析直观——不需要繁琐的培训
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论述
来自异源系统(如大肠杆菌)的蛋白质表达是许多研究领域的重要工具。在这里,我们阐述了fluidlabR-300对于P450酶表达质量评估是如何完成的。使用该工具和标准化学物质可以评估到所产生的酶的纯度和血红素掺入程度只有23%。我们可以得出结论,三组数据极为接近。首先,所表达的P450氧化还原酶*为Bradford试验测定的肽总库的一小部分,该部分可以使用SDS-PAGE或甚至质谱分析来测定。其次,细胞裂解物未经离心产生高杂质,光谱中可以看见在实际含血红素部分附近有一个近紫外峰。细菌细胞对FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的摄取可能需要监测或至少改变,以通过将酶转移到所需的小部分来改善血红素的掺入。监测也可以通过光谱法进行,使用例如铁锌作为比色测定的螯合剂。总体而言,本次质量评估的所有步骤都是通过手持设备完成的,这使得例如在生产环境中的质量控制直接可行,而无需将任何方法转移到另一个分析系统。 河北优势fluidlabR-300便携式细胞计数仪报价表
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