fluidlabR-300便携式细胞计数仪/光谱仪将成熟的光谱仪与自动细胞计数仪相结合,可以执行各种分析,例如吸光度、散射光和时间序列测量、自动细胞计数和免染色存活力测量。直观的操作和精确的测量使fluidlabR-300成为未来的实验室仪器。
⚫可直接在无菌操作台内测量,降低样品污染风险
⚫可直接测量非均质样品并快速绘制成像图,统计样品中各种细胞的含量
⚫快速生成光谱标准曲线,可保存并随时追溯调整,适用于样品定量分析
⚫依照需求输出数据和全息影像,提供后续分析与数据处理
⚫更新软体,随时享用新的系统,无须校正和定期维护 fluidlab R-300 细菌生长和蛋白质含量的测定。北京特制fluidlabR-300便携式细胞计数仪品牌排行
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fluidlabr-300使用全息显微技术和机器学习算法获得准确可靠的细胞计数
介绍方法
细胞样品制备hela细胞在DMEM中培养,通过胰蛋白酶化从瓶的表面分离。为了在细胞计数验证过程中尽量减少样品的变异,HeLa细胞以~106细胞/mL的浓度在冰冻培养基(10%DMSO,20%FBS,DMEM细胞培养基)中小等分冷冻,并在-20°C保存。
同样,酵母细胞(酿酒酵母菌)在酵母培养基(NaCI•蛋白胨缓冲液和蔗糖)中,在20℃下生长2天,以~107个细胞/mL的浓度在15%甘油(v/v)的水中小等份冻存在-20℃。
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血红素掺入的分光光度法观察
上清液在421nm处显示典型最大值,以及575nm和600nm处的两个小峰,可能属于碎片、血红素功能的误掺入或其他掺入的金属离子(图4)。
图4:光谱法观察血红素吸收
血红素占用率的评估
从早期的实验中,已知血红素部分的摩尔消光系数,因此可以确定摩尔比。
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光谱仪的能力如何?
我们的光谱仪在 0 - 2.5 的值范围内呈线性,光度精度为 0.01 或 1 %。可以在 375 nm 和 700 nm 之间捕获光谱,光谱分辨率小于 2 nm。更多信息可以在光谱仪的性能报告中找到。
细胞计数仪的功能如何?
我们的细胞计数仪与手动方法(Neubauer 室)和已建立的自动细胞计数仪均显示出高度相关性(准确度为 99%,确定系数 R²=0.9956)。
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论述
来自异源系统(如大肠杆菌)的蛋白质表达是许多研究领域的重要工具。在这里,我们阐述了fluidlabR-300对于P450酶表达质量评估是如何完成的。使用该工具和标准化学物质可以评估到所产生的酶的纯度和血红素掺入程度只有23%。我们可以得出结论,三组数据极为接近。首先,所表达的P450氧化还原酶*为Bradford试验测定的肽总库的一小部分,该部分可以使用SDS-PAGE或甚至质谱分析来测定。其次,细胞裂解物未经离心产生高杂质,光谱中可以看见在实际含血红素部分附近有一个近紫外峰。细菌细胞对FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸的摄取可能需要监测或至少改变,以通过将酶转移到所需的小部分来改善血红素的掺入。监测也可以通过光谱法进行,使用例如铁锌作为比色测定的螯合剂。总体而言,本次质量评估的所有步骤都是通过手持设备完成的,这使得例如在生产环境中的质量控制直接可行,而无需将任何方法转移到另一个分析系统。 北京特制fluidlabR-300便携式细胞计数仪品牌排行
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