杭州微流控芯片数字PCR如何选型

定量PCR和数字PCR的特点：5.目前定量PCR已经能实现高通量样品条件下的自动化操作。6.数字PCR在单分子层面上的***定量，可以彻底摆脱对标准曲线的依赖而直接给出靶序列的拷贝数，提高了实验结果在批内和批间的稳定性，甚至能用来对标准品进行定标。7.基于***定量的方式，数字PCR结果的高重复性和高精度可实现微小差异的基因表达分析，如等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、microRNA表达分析等等。所谓“微小差异”的标准一般而言是指表达水平的差异在2倍以内。8.同等条件下，数字PCR在灵敏度方面拥有优势，使得该技术已成为**的液态活检、病原微生物检测、转基因成分测定、宿主残留DNA分析等的热门技术。能检测低至0.01%的突变基因。杭州微流控芯片数字PCR如何选型

MicroDrop-100微滴式数字PCR是具有国内自主知识产权的第三代JUE对定量PCR系统，整套系统由MicroDrop-100A微滴生成仪、MicroDrop-100B微滴检测仪以及结果数据分析设备等构成。系统通过自主设计的微流控芯片，利用油水相不兼容的原理，在2分钟时间内将PCR体系分割成100,000油包水的体系，每个体系为 的PCR反应体系，体积约为0.2nL，单次实验一次可生成8个样本的油包水体系。由于油包水体系的分割效应，使得数字PCR受PCRYi制物的影响相对较小，有利于复杂环境样本的实验操作。区别于荧光定量PCR的过程性判读方法，数字PCR结果判读为终点法，故其对PCR扩增效率的依赖也相对较小。杭州微滴式数字PCR哪家好液体活检：早筛、用药、监测、复发。

微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。与传统PCR相比所具有的优势不依赖Ct值或内参基因，即可确定低至单拷贝的待检靶分子的***数目。微滴技术让数字PCR更低成本，且更实用。

与常规的PCR的方法相比，dPCR有很好的优势。***定量常规PCR和实时荧光PCR定量检测都需要已知拷贝数的标准DNA制定标准曲线，由于样品测定在各种条件上不会完全一致，会造成PCR扩增效率的差异，从而影响定量结果的准确性。而ddPCR不受标准曲线和扩增动力学影响，可以进行***定量。样品需求量低在检测珍贵样品和样品核酸存在降解时具有明显的优势。高灵敏度ddPCR本质上是 将一个传统的PCR反应分成了数万个 的PCR反应，在这些反应中可以精确地检测到很小的目的片段的差异、单拷贝甚至是低浓度混杂样品，且能避免非同源异质双链的形成。高耐受性由于目的序列被分配到多个微滴中，***降低了体系间的影响以及背景序列和***物对反应的干扰，扩增基质效应大大减小。可使用第三方PCR反应液，配备PCR A300（温度范围4°C-98°C，扩增模块温控精度±0.2°C）。

MicroDrop-100数字PCR系统具有如下优点：1、JUE对定量，结果判读不需要依赖标准曲线；2、突破局限，检测灵敏度可低至万分之一；3、专利设计的具有高精度复杂三维微纳防污染结构的微流控芯片，单张可同时处理1-8个样本；4、一键式自动操作，20uLPCR体系可生成100,000微滴，8个样本单次微滴生成 需2分钟；5、FAM、HEX（VIC）双荧光通道，半导体激光器做为激发光 源相比LED光源，稳定性高，功率稳定不影响检测灵敏度，单色性能优异降低对检测特异性的影响，且方向性好；6、检测器为2个光电倍增管，灵敏度及增益优于MPCC或CCD,普通的硅光子计数器，增益为10^5，光电倍增管增益可以达到10^9；7、 知识产权的软件系统可直接计算拷贝数、拷贝数浓度，CNV值，突变丰度；阈值线可自动或手动完成，每个样本可单独设定阈值线；输出数据图标、直方图、一维图、二维图、浓度图、95%置信度不确定性区间等；软件可自动识别复杂微滴分簇四簇；软件具备数据质控功能，支持阳性微滴数、阴性微滴数、总微滴数统计及这些指标的任意组合；单个样本100,000微滴的反应体系以及高灵敏度的检测系统，配以独特的软件系统，可以实现高达20重的PCR分析；8、单次检测通量96个样本，操作灵活；MiniDrop™研发团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成。杭州微流控芯片数字PCR如何选型

数字PCR技术与高通量的二代测序技术，共同组成液体活检领域的两大利器。杭州微流控芯片数字PCR如何选型

目前数字PCR技术在临床领域已经有着非常***且***地应用，例如在病原微生物检测中的应用：HBV检测、HIV检测、甲型流感病毒检测等；在产前诊断中的应用：13/18/21号染色体三倍体检测、遗传性耳聋检测、地中海贫血检测及优生五项的病毒检测等；在**靶向***相关基因检 测中的应用：肺*EGFR基因突变、ALK基因融合检测、结直肠*KRAS、BRAF基因突变检测、乳腺*HER2基因扩增检测、神经胶质瘤IDH基因突变检测等。以**靶向***相关基因检测为例，在**形成的超早期,会出现**细胞的坏死和凋亡,这些凋亡或坏死的**细胞会释放其DNA进入外周血,因此通过分析循环血液中是否含有**特异的游离DNA就可以达到**早期筛查的目的。然而此时DNA含量极低,对检测的灵敏度和精确性要求极高，目前只有数字PCR技术可以检测出来。另外进行个体化***时,需要对基因组样本进行分析,此时利用数字PCR技术也能**提高结果的可信性,进而建立合理***方案。杭州微流控芯片数字PCR如何选型

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