CASA系统在男性生殖能力检验应用中的功能要求和参数设置CASA是将现代化的计算机技术和先进的图象处理技术应用于精子质量的临床检验,通过对精子动(静)态图象中精子特性的***分析,为临床提供有关精子质量各项指标的准确数据。CASA系统一般包括硬件和计算机软件支持系统几个部分:(1)相差显微镜、恒温装置和**技术板(Makler板、Macro板或MicroCell计数池等);(2)高速、高分辨率的摄像机和电视监视器组成的摄像系统;(3)计算机分析处理系统及打印机打印输出。CASA系统减少了人为因素对检测结果的影响,提高了检测的客观性和可重复性。美国前向运动精子分析DAP
在精子形态学检查中,通过CASA系统对精子形态学特征进行分析,有些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择,这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[10]。4结论和展望计算机辅助**分析具有较好的可靠性、重复性和稳定性,与传统的光学显微镜目测估计相比,更具有快速方便、对比性强、便于交流等明显优点[11],常规**检查无法测定精子微细运动特点,显示CASA在男性不育症诊断筛选中的优越性。王益鑫亦发现,部分手工**检查正常的不育患者,进行**全自动分析及生化检测,均发现明显异常[12]。因此,CASA系统在男性生殖能力检验方面具有重要的实际应用意义。狗精子分析频闪光源全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织(WHO)和KRUGER标准,并通过ISO9001认证。
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。
精子分析仪使用注意事项1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池,能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀,用微量取液器取5~7ul**加入样品池中,用0.5mm厚皿盖片盖紧。2.不洁净的计数池可影响精子的活力,尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。3.精子样品密度过大时,造成图像处理上的粘连,无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时,需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察,以提高样品检出率。Hamilton Thorne精子分析仪具有高度的可靠性和稳定性,能够长时间稳定运行,保证数据的准确性和可重复性。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。CASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。南京绵羊精子分析DCL
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,前向性(STR):平均路径的直线性。美国前向运动精子分析DAP
精子动力分析仪在各物种精子检测方面具有明显重要作用。它具有高度的客观性,该仪器通过相差的图像分析技术和算法,对精子的运动参数进行精确测定,避免了人工观察和评估时可能出现的主观偏差,结果更加准确可靠。其次,检测参数丰富。它不仅能提供精子活力、浓度等基本信息,还能详细分析精子的运动轨迹、速度变化、摆动频率等多种参数,从多个维度评估精子质量,为实验提供更完善的依据。仪器可处理大量精子样本,在短时间内生成详细的检测报告,提高了检测效率。其操作相对简便,操作人员可以尽快掌握操作方式,经过一定培训后即可熟练操作,有利于在不同领域里广泛应用。美国前向运动精子分析DAP
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