Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术,无需对卵母细胞进行染色,即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像,对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。
主要应用ICSI:在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞,避免卵的破裂损伤,增强胚胎的发育潜能。卵评估:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。体外成熟评估:在未成熟卵催化(IVM)过程判断成熟期,判断依据采用的是准确的识别纺锤体,而非不准确的极体。质量控制:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。
核移植:显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质,使得核移植的成功率增加了80%,并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究:对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析,从而判断卵的发育力,改善妊娠率。纺锤体研究:检测胚胎中纺锤体的发育过程,确定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培养箱的显微镜)。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像,从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究:测量卵母细胞的透明带;准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化,判断纺锤体和透明带是否处于正常状态 纺锤体在细胞分裂过程中与细胞骨架协同工作。武汉哺乳动物纺锤体透明带
在卵母细胞冷冻保存过程中,纺锤体的形态变化是评估冷冻效果的重要指标之一。传统的纺锤体观察方法往往需要将卵母细胞固定并进行免疫荧光染色,这不仅破坏了细胞的活性,还限制了进一步观察其发育潜能的机会。而偏光成像技术则能够在不解冻、不染色的情况下,直接观察纺锤体的形态变化。通过Polscope系统,研究者可以实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,评估冷冻保护剂对纺锤体的保护效果,以及解冻后纺锤体的恢复情况。冷冻后的卵母细胞纺锤体及染色体异常率增高,这将直接影响解冻后卵母细胞的减数分裂进程和胚胎的染色体正常性。利用偏光成像技术,研究者可以准确评估冷冻前后纺锤体的异常率,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等参数。通过对比分析,可以明确冷冻过程对纺锤体的具体影响,为优化冷冻保存条件提供科学依据。香港成熟卵母细胞纺锤体卵细胞评价纺锤体形成的精确性对于维持生物体遗传稳定性至关重要。
玻璃化冷冻技术因其快速冷冻和解冻的特点,在哺乳动物纺锤体卵冷冻保存中展现出巨大优势。该技术通过极快的降温速率和高浓度的冷冻保护剂,使细胞内溶液在冷冻过程中呈玻璃态而非结晶态,从而避免了冰晶对纺锤体的损伤。此外,研究者们还尝试将微流控技术、激光辅助冷冻等新技术应用于卵母细胞的冷冻保存中,以进一步提高冷冻效果。为了准确评估冷冻对纺锤体的影响,研究者们开发了多种纺锤体稳定性评估技术。例如,通过偏光显微镜观察纺锤体的形态变化;利用免疫荧光染色技术检测纺锤体相关蛋白的分布和表达;以及通过分子生物学方法检测纺锤体相关基因的转录和翻译水平等。这些技术的应用为深入研究冷冻过程中纺锤体的变化提供了有力支持。
纺锤体检查点是确保染色体正确分离的重要机制,其失效会导致染色体分离错误。例如,某些基因突变(如MAD2突变)会影响SAC的功能,导致染色体非整倍性的发生。SAC信号传导异常:SAC通过复杂的信号传导途径确保染色体的正确分离。SAC信号传导异常会导致纺锤体检查点失效,增加染色体非整倍性的风险。染色体在分裂过程中未能正确分离,导致非整倍体的形成。例如,某些基因突变(如CENP-A突变)会影响染色体的正确分离,导致染色体非整倍性的发生。染色体桥是染色体在分裂过程中未能完全分离形成的结构,会导致染色体非整倍性的发生。例如,某些基因突变(如PLK1突变)会影响染色体桥的形成。纺锤体的功能异常与某些药物的副作用有关,如化疗药物可能干扰纺锤体的形成和功能。
阿尔茨海默病患者中,微管蛋白(如tau蛋白)的突变和异常磷酸化会影响微管的稳定性和纺锤体的组装,导致染色体分离异常和细胞周期紊乱。纺锤体功能障碍会导致染色体不稳定,增加基因组的不稳定性,进而影响神经元的正常功能和存活。正常情况下,成熟的神经元处于G0期,不会重新进入细胞周期。然而,阿尔茨海默病患者中,神经元可能会重新进入细胞周期,但由于纺锤体功能障碍,无法完成正常的细胞分裂,导致细胞凋亡。在神经元中,纺锤体的正常功能对于神经元的发育、分化和维持至关重要。 纺锤体的中心体在细胞分裂前会复制并分离到细胞两极。上海纺锤体实时成像纺锤体纺锤体结构
纺锤体在细胞分裂完成后迅速解体,为细胞质分裂提供空间。武汉哺乳动物纺锤体透明带
纺锤体是卵母细胞在减数分裂过程中形成的一种微管结构,负责精确分离染色体。然而,纺锤体对环境温度、渗透压等外部条件极为敏感,在冷冻保存过程中容易发生损伤,导致染色体分离异常,进而影响卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。因此,如何有效监测和评估冷冻过程中纺锤体的变化,成为纺锤体卵冷冻研究的重要课题。纺锤体实时成像技术的出现,为这一问题的解决提供了可能。纺锤体实时成像技术主要利用高分辨率显微镜结合荧光标记技术,对卵母细胞内的纺锤体进行实时、动态的观察和记录。常用的荧光标记方法包括使用绿色荧光蛋白(GFP)标记微管蛋白,以及利用特定抗体对纺锤体相关蛋白进行染色。通过这些方法,研究者可以清晰地观察到纺锤体的形态、位置、动态变化等信息,从而准确评估冷冻过程中纺锤体的稳定性和完整性。武汉哺乳动物纺锤体透明带
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