1.基本检查:是确定精液变量稳定的常规方法,不仅是男科实验室,任何开展精液检查的实验室都能遵循。精子计数依然推荐使用改良Neubauer血细胞计数板的方法,但计数的方法有了改变。明确推荐了伊红笨胺黑染色法作为精子存活率诊断的优先方法,伊红染色和低渗肿胀实验只作为备选方法。删减了参考值下限的描述。对于精子活动率大于40%的样本没有必要做存活率评估。与第5版手册中淡粉色判读为活精子不同,明确了只有精子头为白色的精子为活精子、淡粉色为死精子。临床数据表明,鉴别快速前向运动精子非常重要。因此,关于精子活力分级,第6版手册建议恢复到快速前向运动、慢速前向运动、非前向运动和不活动4个活力级别,但精子活动率的参考值范围却依然是按前向运动(PR)、非前向运动(NP)、不活动(IM)3个活力级别计算。第6版手册强调,精子形态学评估的价值不仅在于其可用于判断自然妊娠和辅助生殖技术(ART)结局的预后,还可以为男性生殖***包括睾丸和附睾功能判断提供更多诊断信息。对于3%和5%的精子“正常”形态率的判断,则要求必须由训练有素的人员评估1500个精子来完成;对于无尾精子(只有头部的精子)超过总精子数20%的精液,应单独计算并在报告中注明;通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算,从而得出精子动静态各项参数。全自动化精子分析精子动力分析
CASA,即计算机辅助精子分析,是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调,相比人工检测,CASA提供更准确的数据和精子动力学参数,如前向运动和超活化运动,以及获能精子特征参数。研究显示,CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪,通常通过相差显微镜识别活动精子,适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果,操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹,更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪,通常进行两次分析,每次至少200个精子,结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时,需精确测量精子体积,确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键,每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**,可能需要稀释以减少误差。形态分析方面,CASA能够定量评估精子头部、中段和主段,尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**,可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语,如VCL(曲线速度)、VSL(直线速度)等,它们反映了精子运动的不同特性。上海浓度精子分析STRCASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。
测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数:这是传统的测定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类,这一步非常重要,因为完整的精子才能被计数。然后,将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉,通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧,而且受到许多因素的影响,如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析:随着科技的发展,现在有全自动的精子分析仪,可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行,可以测量大量精子,包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果,并且减少了人为错误。在进行精子计数前,男性应避免长时间禁欲,因为这可能会影响精子的数量和质量。同时,健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。
医生处置质量是指诊断质量是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果[5]。CASA在医生处置质量方面的特点在于:①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式(温度、稀释法、缓冲液)确定时通过个体内和个体间的比较CASA的精子活力重复性明显好于直观评估[6]。②实验室数据资料是质量的一部分CASA系统所有数据都是直接在线获得的因此明显优于其他方法[6]记录传递到数据库的过程无错误发生可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较[9]、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量特别是在精子形态学检查中通过CASA系统对精子形态学特征进行分析[7]这些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[8]。就形态学分析而言传统方法的可变性远远大于CASA分析。不同品牌CASA分析的结果差异较大,因此,更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。
五、精子活动力检测[正常参考值]**后30-60分钟活动力为Ⅲ级以上的精子>0.80:**后120分钟内活动力为Ⅲ级以上的精子>0.60;**120分钟后0.25-0.60的精子仍能活动。[临床意义]活动不良或不活动的精子增多,是导致不育的重要原因之一。常见于精索静脉曲张、泌尿生殖系的非特异性***如大肠杆菌***,某些代谢药、抗疟药、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活动力下降。六、精子计数[正常参考值](100-150)×109/L或一次排精总数为(4-6)×108。[临床意义]1.精子计数小于20×109/L或一次排精总数少于1×108为不正常,见于精索静脉曲张、铅金属等有害工业污染、大剂量放射线及某些药物影响。2.精液多次未查到精子为无精症,主要见于睾丸生精功能低下,先天性输精管、精囊缺陷或输精管阻塞。输精管结扎术2个月后精液中应无精子,否则说明手术失败。3.老年人从50岁开始精子数减少以至逐步消失。CASA系统用量少,检测速度快,能够显著提高实验室的工作效率。上海浓度精子分析STR
该设备的设计紧凑,占用空间小,适合不同规模的实验室使用。全自动化精子分析精子动力分析
在精子形态学检查中,通过CASA系统对精子形态学特征进行分析,有些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择,这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[10]。4结论和展望计算机辅助**分析具有较好的可靠性、重复性和稳定性,与传统的光学显微镜目测估计相比,更具有快速方便、对比性强、便于交流等明显优点[11],常规**检查无法测定精子微细运动特点,显示CASA在男性不育症诊断筛选中的优越性。王益鑫亦发现,部分手工**检查正常的不育患者,进行**全自动分析及生化检测,均发现明显异常[12]。因此,CASA系统在男性生殖能力检验方面具有重要的实际应用意义。全自动化精子分析精子动力分析
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