抗体芯片实验室服务思考留给科研,实验外包出去! 抗体芯片是蛋白芯片的一种,具有微型化、集成化、高通量化的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转异、蛋白质组学、**及其他疾病的相关研究。 抗体芯片检测的样本类型包括提取物、细胞培养上清、血清血浆等,检测的方式通过生物素标记的方法完成样本标记,然后芯片孵育,样本中相关蛋白与芯片上特异性抗体结合,通过荧光的方式使用芯片扫描仪检测。实验获得的数据将通过标准的数据处理流程进行分析。 抗体芯片检测的优点:灵敏度高、特异性好、重复性佳、准确性高 抗体芯片的检测内容包括:抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。6Ckine
Luminex液相悬浮芯片利用梯度稀释的标准品检测信号,构建标准曲线,还可对96孔微孔板中的样品的多种细胞因子进行同步相对定量。Luminex液相悬浮芯片的技术优势远超传统ELISA,特别适合大批量样本中多个特定因子的定量检测。由于Luminex悬浮芯片的规格是1张芯片可以检测多达78例样本,许多研究人员在日常实验研究(例如动物实验、细胞实验)中往往只有十几例到几十例不等的样品需要检测,用整张Luminex芯片就存在浪费情况。为帮助广大研究人员在样本数量较少的时候也能够享受Luminex芯片技术带来高质量数据及便利。LabEx推荐出使用频率和稳定性均靠前的Luminex芯片开展全国研究人员“拼板”业务。每张芯片多可检测80例样本,参与拼板的项目10例起拼,拼板成功立即启动实验,两周内即出报告!自身免疫因子服务生物标志物检测--加速推动免疫学研究进展!
问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。
酶联免疫斑点技术(Elispot)技术优势(1)单细胞水平,活细胞功能检测:弥补了体液中CK半衰期短的不足,当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济,可以进行高通量筛选:既可检测自发分泌细胞,又可检测抗原特异性CK分泌细胞,具有较高特异性,并可观察药物治疗反应,且使对CSF中T、B细胞研究成为可能,对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高:在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。
炎症相关的生物标志物包括:(1)肠道微生物因子:肠道菌群可能受到饮食,益生菌,益生元,外源酶,粪便菌群移植和其他环境因素的影响(2)免疫相关:肠道菌群驱动炎症的扩大,细胞浸润固有层,包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子,包括TNF,IL-1β,IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。(3)炎症介质:如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子(如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β)等。多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。黏附因子筛查
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。6Ckine
LabEx隆重推出抗体相关服务:FC、ELISA、多因子检测、抗体芯片……酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbentassay简称ELISA)是在免疫酶技术(immunoenzymatictechniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,ELISA过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原),再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生成正比。6Ckine
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