全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。
对病毒全基因组进行测序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。病毒基因测序分析哪家好
病毒(Virus)由一种核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质(Protein)构成或由蛋白质构成(如朊病毒)。根据遗传物质的组成,可分为单链DNA病毒(ssDNA)、双链DNA病毒(dsDNA)、单链RNA病毒(ssRNA)、双链RNA病毒(dsRNA)和蛋白质病毒(如朊病毒)。根据宿主类型的不同,可以分为噬菌体(细菌病毒)、植物病毒(烟花叶病毒)和动物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因组测序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量测序技术,对病毒全基因组进行测序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列,解析编码信息,并获得相应的变异信息。
广东病毒序列服务高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析.
一直以来,病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比,NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列,测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大,其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本,研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性,丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本,无法通过PCR进行富集,要鉴定其种类需要调用各种方法,逐个尝试,工作量之大,其效率之低,使得一个新的研究方法的出现及其必要。
病毒全基因组测序具有的特点:1.不预设目标检出物,样本的所有病原信息一网打尽;2.无需培养和特异性扩增,对采集临床样本直接检测;3.独有的一定定量技术,实现病原定量分析,使病原诊断更准确;4.与临床各领域有名**共同打造呼吸道系统、神经内科系统和血流系统传染病原数据库,更加贴合需求;5.采用高通量测序仪,全流程质控,结果稳定可靠;6.整体检出率阳性率较传统方法提升25~30%:肺泡灌洗液检出率60~80%,脑脊液检出率40~60%,血液检出率40~60%;7.专业化服务:临床微生物**出具报告,专业医学团队报告解读。针对疑难报告,由**进行深度解析;8.完善的售后服务:基于PCR技术和抗原抗体技术的售后验证平台,致力于解决临床的每一个疑问。
病毒全基因测序不仅需要精密的仪器设备,也需要检测人员具有丰富的经验和过硬的技术。
有哪些病毒学研究常用方法? 细胞病变效应(cytopathic effect,CPE):由病毒增殖引起的细胞改变称细胞病变效应。 不同种类病毒可引起不同细胞病变效应。如: ①细胞圆缩、分散、溶解,如肠道病毒、鼻病毒、披膜病毒、痘病毒等; ②细胞融合成多核巨细胞,如疱疹病毒、副粘病毒、呼吸道合胞病毒; ③细胞肿胀、颗粒增多、病变细胞聚集成葡萄状,如腺病毒; ④胞质出现空泡,如SV40细胞; ⑤细胞浆或核内出现嗜酸性或嗜碱性包涵体,一至数个不等; ⑥轻微病变,如正粘病毒、狂犬病毒、冠状病毒和逆转录病毒等; ⑦培养液pH的变化。病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析。成都病毒全序列测序突变分析哪家好
探普生物优化了自有数据库。病毒基因测序分析哪家好
对病毒的全基因组进行测序的价格合理,样品具备什么条件才可以获得比较质量的组装效果?其他公司对用于测序的样本的要求较高。探普生物对病毒的全基因组进行测序是基于探普的专有流程,样本要求非常低,不要求粒子纯化,不要求总量到达微克,按探普的专门的收样标准和送样流程进行即可。简言之,经过细胞或其他方式培养的样本,若载量较高,不需要复杂处理,直接破碎细胞取上清提取核酸都可以获得非常好的组装效果;而临床标本,需要看情况,对于被侵害严重的个体,释放较高的部位也可以获得很好的效果;其他类型的样本,就需要测ct值来确定是否可以进行实验,以及评估测序效果。
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