ppp的外泌体

在20世纪80年代，外泌体被描述为从网织红细胞分泌的内体来源的囊泡。人们对这些细胞外囊泡的兴趣逐渐增加，因为它们似乎参与了很多细胞过程。外泌体携带蛋白质、脂质和RNAs，介导体内不同细胞类型之间的细胞间通讯，从而影响正常和病理状态。只有近，科学家才认识到将外泌体与其他类型的细胞外囊泡分开的困难，这排除了特定功能对不同类型分泌的囊泡的明确归因。为了阐明这个复杂但正在发展的科学领域，该综述着重于外泌体和其他分泌的细胞外囊泡的定义。讨论了它们的生物发生，分泌及其后续的命运，因为它们的功能依赖于这些重要过程。随着EV研究倍受世界瞩目，各国启动了大型研究项目。ppp的外泌体

Exosome（外泌体）是由活细胞分泌小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持，此外还与疾病的产生有关。对分离的外泌体进行体外标记或示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等。PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更长的半衰期，标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。外周血提取试剂盒细胞外囊泡（EVs）表示了细胞间通讯的一个重要模式。

虽然外泌体作为药物载体具有生物兼容性、稳定性和内在靶向性等潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：选择何种细胞作为外泌体的供体：如DCs来源的外泌体可用于免疫治理，因其富含组织相容复合物（MHC）及T细胞共刺激分子，能在体内唤醒T淋巴细胞，进而抑制瘤细胞增殖；骨髓来源的间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体对KRAS基因有抑制作用；γδT细胞、自然杀伤细胞（NK）、瘤细胞等均有研究报道可作为载药级别外泌体的细胞来源。

在运输DOX的研究中，Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞，通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b，这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iRGD肽结合，使外泌体对DOX的运输具有靶向性。将对iRGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiR染料标记，并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内，观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处，在注射2h后外泌体的含量高，而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏，几乎很少到达中流组织处，说明对iRGD肽靶向的外泌体具有很好的靶向性。日本和光着眼于巨噬细胞的外泌体受体Tim4蛋白，制备Tim4细胞外域与磁珠结合的“Tim4磁珠”。

妊娠期间胎盘可释放外泌体到全身循环系统，参与妊娠期间母胎界面的免疫调节、子宫螺旋动脉重塑和胎盘屏障的形成等重要事件调控，在正常妊娠过程维持中发挥重要作用。而很多妊娠并发症，如子痫前期等胎盘功能紊乱相关疾病的发生，很可能与胎盘来源外泌体异常密切相关。目前外泌体分离方法主要包括：多步差速离心、蔗糖密度梯度离心、试剂盒沉淀、免疫磁珠分选、色谱法、过滤离心等方法。其中，多步差速离心是制备外泌体的经典方法，该方法是根据外泌体的沉降系数差速离心将其分离出来，然而妊娠期母血清中除含有胎盘组织释放的外泌体，还包括许多其他种类细胞释放的外泌体，如树突状细胞、淋巴细胞等，且血清中可能还存在一些大小类似的物质混杂其中，这些因素都会影响胎盘来源外泌体的分离纯化。干细胞外泌体对多种类型的免疫细胞均具有免疫调节作用。ppp的外泌体

细胞分泌到细胞外环境中分别称为外泌体和微泡的细胞外膜泡。ppp的外泌体

外泌体的提取方法：超速离心法，这是外泌体提取比较常用的方法。超速离心法得到的外泌的体量比较多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡而不是外泌体。过滤离心法，这种操作简单、省时，不会影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期的准备工作繁杂，比较耗时，量少。ppp的外泌体

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