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qPCR第三方检测方法的分析验证有哪些内容?效率不仅是PCR效率,还包含反转录(Reversetranscription,RT)的效率。RT效率是指RNA合成cDNA的效率,如果1,000个RNA分子变成1,000个cDNA分子,效率就是100%,实际上很多RT酶的效率对于不同浓度的RNA样本存在差异,这样cDNA扩增后的结果并不能真实反映样品中RNA的水平。PCR效率是指DNA在扩增的每个循环中复制的效率,每个循环增加2倍,其效率就是100%,这也和所选试剂、引物、模板质量密切相关。梯度稀释实验得到的标准曲线可直观地显示各浓度理论值和测得的Cq值的相关性,其中R2值表示各个数据点是否正好落在标准曲线上,当R2<0.98时,表明数据偏差较大。云南耗材第三方检测公司
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