药物性肝损伤(DILI)是临床常见的肝损伤类型,是严重的药物不良反应之一。细胞死亡是DILI的重要特征,药物可通过诱导内质网应激和死亡受体等方式凋亡通路,诱导肝细胞凋亡或坏死,诱发肝损伤。除凋亡和坏死外,DILI过程中还伴随着自噬、焦亡和铁死亡。自噬可以去除受损的蛋白质以及细胞器,是肝细胞存活的重要机制,但也可能诱导肝细胞死亡。焦亡和铁死亡是近发现的细胞死亡方式,其在DILI中的作用尚未完全阐明。阻断肝细胞死亡通路,是DILI的重要手段。水飞蓟素、柚皮素、人参皂苷等可以抑制肝细胞死亡通路,是DILI的潜在药。针对不同细胞死亡方式的机制和特点,研究改善肝细胞死亡的药物对DILI具有重要意义。总结了DILI中肝细胞死亡的机制,并论述了潜在的药物。 原代肝细胞的厂家哪个好?上海中乔新舟告诉您。江苏动物原代肝细胞培养
原代肝细胞分离试剂盒说明书实验方案参考一、设备和试剂准备(一)仪器设备(组织块)超净工作台或者生物安全柜、水浴锅、一次性100mm培养皿1个、灭菌剪刀和镊子若干、灭菌100mL摇瓶、电动移液器、一次性15/50mL离心管若干、一次性50mL注射器及μm过滤器若干、100mL无菌试剂瓶、离心机、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其喷壶、、碎冰、泡沫盒。(二)仪器设备(实体消化)超净工作台或者生物安全柜、水浴锅、蠕动泵(LongerPump,YZ1515X)、手推式电动废液缸、一次性100mm培养皿1个、乳胶管(灭菌、长度168cm,规格充满14ml液体)、灭菌剪刀和镊子若干、灭菌动脉夹、灭菌止血钳、一次性输液针(黑色*25)、电动移液器、一次性15/50mL离心管若干、一次性50mL注射器及μm过滤器若干、100mL无菌试剂瓶、离心机、泡沫板、废液托盘、固定针头、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其喷壶、、碎冰、泡沫盒、新鲜配置6%的戊巴比妥钠。 山东巨噬原代肝细胞多少钱原代肝细胞的用途?欢迎致电上海中乔新舟!
原代肝细胞属于高度分化的细胞,对体外培养条件的要求比传代细胞高,其在体外存活时间也比传代细胞短,采用单层胶原培养法进行体外培养的原代肝细胞存活时间为1周左右[25]。本实验是在Seglen两步灌流法的基础上进行改进,结合逆向灌流、多次低速离心等方法成功分离获取活率高、纯度高的原代肝细胞,且体外存活时间可达1周,与文献[25]报道一致。体外培养48h后给予不同浓度的FFA混合物(油酸∶棕榈酸=2∶1)进行诱导,诱导24h后油红O染色显示肝细胞内有脂滴沉积,肝细胞内TG含量增加,且随着FFA浓度升高而增加,成功构建了肝脂肪变性细胞模型。本方法操作简单、时间短、成功率高,因此具有广泛应用价值。
小鼠原代肝细胞的形态学观察本实验在Seglen两步灌流法的基础上改进,平均每只小鼠肝脏可获得3×107~5×107个细胞。台盼蓝染色结果显示,即时分离的原代肝细胞活率可达到85%~90%。即时分离的原代肝细胞胞体呈圆形或类圆形,多为单核或双核,细胞间边界清晰(图1A)。接种后的肝细胞4h开始贴壁,24h大部分肝细胞贴壁,细胞形态多呈多角形或不规则形,细胞核大而圆,可见明显的双核或多核,细胞有向外延展趋势,细胞间边界不清(图1B)。此外,按上述方法分离出的原代肝细胞在体外可存活1周左右,其中3~5d状态比较好,第6天开始细胞凋亡增加 上海的 原代肝细胞服务厂家。欢迎来电咨询上海中乔新舟!
传代培养:1.倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代。2.培养液瓶打开后,过酒精灯火焰,置酒精灯火焰周围。3.拿出直头滴管,套上橡皮吸头,过火,放入培养液瓶中。4.打开培养瓶,瓶口过火,将培养瓶内的培养液轻轻倒入废液缸,用2-3mLPBS洗去残留的旧培养基。5.培养瓶加入,用量以薄薄盖满一层为宜,37℃消化,倒置显微镜下观察到细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉,加入少量的含血清的新鲜培养基。6.取弯头滴管反复吹打细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基,制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖上瓶盖,适度拧紧后再稍回转,以利于CO2气体的进入,将培养瓶放回CO2培养箱。7.对半贴壁培养细胞,不需胰酶,直接吹打,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。 原代肝细胞有什么特点?上海中乔新舟告诉您。山东巨噬原代肝细胞多少钱
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肝脏,是脊椎动物体内以代谢功能为主的,也是人的五脏之一。肝脏能促使一些有毒物质的改进,再排泄体外,从而起到作用。它是人体内的一座“化工厂”,是新陈代谢的重要。但同时,肝脏也十分脆弱,过度的酒精、药物带来的毒性也会对其造成不可逆的损伤。因此无论在疾病研究、药物研发,或是环境安全等的研究中,对肝脏进行研究都至关重要。在这些研究中使用原代肝细胞,往往是比较好的选择。因为原代细胞离体时间短,保持了其在体内的生物学特性,更接近体内环境的研究模型。同时也无须担心动物实验的伦理问题,亦可减少动物实验所需要的的成本开支,实现了减少(Reduction)、替代(Replacement)、优化(Refinement)的3R伦理原则。 江苏动物原代肝细胞培养
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1、原代细胞:ScienCell(中国区正规一级代理)人源和动物源各种原代细胞。
2、培养基:原代细胞**低血清、无血清、无异源蛋白无动物成分培养基。
3、细胞培养试剂:胎牛血清、原代细胞转染试剂盒、细胞实验检测试剂盒、细胞生长因子、ELISA试剂盒、定量PCR芯片试剂盒、DNA/RNA及细胞裂解物等。
4、细胞系(株):种类丰富(1000余种),已通过STR鉴定;提供细胞株完全培养基。
5、自研产品:支原体检测/qing除试剂盒、端粒酶检测试剂盒、人源/动物源ELISA试剂盒等系列产品。
6、技术服务:绿/红色荧光蛋白标记、荧光素酶标记、慢bing毒介导基因沉默或过表达及稳转株的构建,细菌基因敲除、细胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能学实验。