金华RPMI 1640培养基（无硝酸钙）

细胞和组织培养为什么需要使用血清？血清通常作为补充剂，以2-10%的浓度加入培养基中，为细胞提供综合营养、元素、生长和附着因子。血清还可作为细胞培养系统的缓冲液，避免各种因素（包括pH变化、蛋白水解活性或重金属、内毒等）干扰细胞生长或产生毒性作用。血清是如何加工的？血清采集后冷冻运输至加工工厂，解冻并检测细菌、病毒、内有害元素和血红蛋白含量等多项指标。选择更优良的血清在无菌环境下进行系列膜过滤无菌处理，然后在无菌环境下进行分装并快速冻存于-20°C，在所有批次验证达到或找过QC标准之前隔离存放。对于细胞培养而言，胎牛血清（FetalBovineSerum，FBS）的重要性不言而喻。金华RPMI 1640培养基（无硝酸钙）

我们都知道干细胞是十分脆弱的，培养干细胞大多使用胎牛血清来完成实验。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质更高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。优良的胎牛血清不仅为细胞提供细胞生产提供不可替代的营养成分，也会让细胞培养实验更轻松。提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。提供天然的结合蛋白，能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等，能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多个钙离子结合位点，因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。龙港DMEM(高糖）培养基（含双抗）胎牛血清在消化过程中提供蛋白酶抑制剂，在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清营养成分完全而丰富，代谢产物极少，微生物传染的可能性更小，品质更高，是组织细胞培养和病毒增殖时的重要营养来源。在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲)，更常使用的胎牛血清(澳洲)浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，在实验中使用10%的澳洲胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲)，要根据具体细胞选择合适的胎牛血清(澳洲)浓度。

牛血清是细胞培养中用量比较大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的jisu，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他jisu等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到jiedu作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。胎牛血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等。

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清区别三者之间的区别：1、采集血液时间不同，胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛怀孕5-8个月时，通过胎牛心脏穿刺采集血液获取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。2、组份与比例不同，两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、元素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。用途与用法不同，某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清，胎牛的血清相对来说比较纯。DMEM (Low Glucose)供货商

胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。金华RPMI 1640培养基（无硝酸钙）

使用胎牛血清的注意事项：注意解冻的方法，再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则，因此在解冻血清的时候，要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点，事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来，便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外更好采用分步解冻的方式解冻血清，即先利用冰箱或冷库将其溶解满几天，之后在室温下全溶后再进行分装。胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清，那么需要注意的是，加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做，是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求，客户可以自行选择是否进行灭火处理。金华RPMI 1640培养基（无硝酸钙）

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