免疫荧光技术服务检测服务

上海乐备实生物技术有限公司（简称：乐备实）是优宁维的全资子公司，是国内主要专注于提供单/多因子相关检测分析的实验服务专家，目前已经扩展到多色流式检测服务和多色组化检测服务。LabEx成立于2018年，前身为成立于2015年的优宁维实验室服务事业部，总部位于上海。自成立以来，LabEx不断寻求突破，目前已发展成为具有成熟的样本制备、储存、管理、运输以及检测、数据分析等服务，我们有严格的实验室管理流程、标准化实验室操作、原始数据储存体系以及实验项目优化系统，努力打造在基因、细胞、蛋白、组织等水平的专业实验室技术平台。我们现有PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、流式、免疫组化等12个技术平台。通过线下和线上的方式为超过1000个客户提供服务，年检测样本超过20万，受到了广大客户的赞赏。LabEx继承优宁维的向正、向善、向上的价值观，我们的愿景是“服务加速研究-SpeedUpResearch”，努力为广大客户提供专业、安全的实验室服务，成为你科研的得力助手！LabEx提供28种抗体芯片，用于人，小鼠和大鼠物种的蛋白检测。免疫荧光技术服务检测服务

抗体芯片技术服务包括：1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。ENA-78检测服务LabEx提供抗体芯片技术(Antibody Array)服务！

Q：ELISA实验预实验的目的？A:确认一下样本的稀释比例，虽然试剂盒给出了一些建议，但是不同客户的样本处理方式不同，可能会出现高出标准曲线的情况，那就要预实验测试看下B、降低客户的预期，如果预实验反馈出，客户的结果在检测下限附近，可以让客户更换样本，节省试剂盒Q：ELISA实验预实验是如何安排的？A：会做整条标准曲线，比较好由客户自己挑选的有代表性的预实验样本，至少2个（高值与低值各一，各4个稀释梯度），**少耗费16个孔；若客户吝惜试剂，可只做标准曲线的两个点（比较高点和背景点，确认预实验样本的浓度是否在背景点以上或者是附近），预实验样本做几个稀释度测试（至少2个样本各3个稀释度），**少耗费8个孔；为避免样本反复冻融或正式实验样本不够，预实验样本需要另外准备；

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。LabEx 流式平台：BD C6，BD celesta，BD calibur，12色流式检测分析。多重荧光免疫组化方法

MSD作为现阶段灵敏度较高的检测技术，常用于常规生物标志物检测和信号通路研究。免疫荧光技术服务检测服务

Q：多因子实验还用的样本类型有可些?A：Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）、FluidPeritonealFluid（腹腔液）等等。Q：多因子实验中血清好检测，还是血浆好检测?A：文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验，具体需研究者根据自己实际条件选择。Q：为什么要做预实验?A：试剂说明书中的样本稀释比例不精确，需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例，让尽可能多的因子在检测范围内，从而提高检出率。2.避免样本浓度过高，导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q：血清血聚溶血，对实验结果有形响吗?A：肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，从目前文献上看没有明确的数据支持。免疫荧光技术服务检测服务

上海乐备实生物技术有限公司成立于2018-04-28年，在此之前我们已在标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务行业中有了多年的生产和服务经验，深受经销商和客户的好评。我们从一个名不见经传的小公司，慢慢的适应了市场的需求，得到了越来越多的客户认可。公司主要经营标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务，公司与标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务行业内多家研究中心、机构保持合作关系，共同交流、探讨技术更新。通过科学管理、产品研发来提高公司竞争力。公司秉承以人为本，科技创新，市场先导，和谐共赢的理念，建立一支由标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务专家组成的顾问团队，由经验丰富的技术人员组成的研发和应用团队。上海乐备实生物技术有限公司依托多年来完善的服务经验、良好的服务队伍、完善的服务网络和强大的合作伙伴，目前已经得到医药健康行业内客户认可和支持，并赢得长期合作伙伴的信赖。