细胞和组织培养为什么需要使用血清?血清通常作为补充剂,以2-10%的浓度加入培养基中,为细胞提供综合营养、元素、生长和附着因子。血清还可作为细胞培养系统的缓冲液,避免各种因素(包括pH变化、蛋白水解活性或重金属、内毒等)干扰细胞生长或产生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷冻运输至加工工厂,解冻并检测细菌、病毒、内有害元素和血红蛋白含量等多项指标。选择更优良的血清在无菌环境下进行系列膜过滤无菌处理,然后在无菌环境下进行分装并快速冻存于-20°C,在所有批次验证达到或找过QC标准之前隔离存放。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。McCoy's 5A培养基供应价格
血清中出现沉淀的原因很多:反复的冻融会使血清脂蛋白发生变性造成浑浊,可通过分装成单次用量减少冻融来尽量避免此种情况。血清是在低温环境下迅速加工以保持其生长特性,血清中遗留的一些纤维蛋白原在解冻时会转化成纤维蛋白。过量的纤维蛋白在血清中呈现为可见的絮状物质,可通过400xg离心移除。不建议通过过滤血清来移除絮状物质,因为滤器可能堵塞,或者意外截留到重要的蛋白质。牛血清产品检测项目包括内有害元素、细菌、菌体、霉菌、支原体和噬菌体检测吗?胎牛血清采用非常严谨的标准检测过这些相关微生物的污染,具体可以参加每批次的CoA。什么是γ辐照的血清(胎牛血清)?γ辐照的血清通过暴露于放射性60Co产生的25-40kGy剂量的γ射线来灭活病毒和其他外来微生物(比如支原体)。γ辐照处理不影响血清的理化性质或细胞培养性能。衢州Masson三色染色试剂盒胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。
胎牛血清使用中的常见问题:血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是更好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。
胎牛血清与新生牛血清的区别:组份与比例不同,虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别,可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同,而且两者之间的元素以及其他活性物质的比例也不同。胎牛血里的生长因子适合牛体内各种细胞生长,通常在8个月胎龄后慢慢消失。另外,胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清,胎牛的血清相对来说比较纯,所以培养细胞的效果会更佳。用途与用法不同,由于胎牛血清与新生牛血清存在细微差异,因此它们的用途与用法也不尽相同。胎牛血清可提供γ射线辐照处理的血清现货,灭活病毒和其他外来微生物。
如今已经成为各大实验室“常客”的胎牛血清,是一种采集自新鲜的牛血液的优良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的营养物质以及提供接触和伸展因子,有效避免细胞贴壁受到机械的损伤。如此看来胎牛血清确实发挥出非常大的作用,那么为了让其充分发挥更大的价值该注意哪些事项呢?注意避免沉淀加入培养液,添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液,因为如果培养液有沉淀的存在,会使得其中培养的细胞产生大量的黑点,除此之外,细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质,总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了更大程度减少血清的损失,可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理,之后便可将上清液加入培养液中使用。进口的胎牛血清:过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的。Masson三色染色试剂盒供应报价
血清根据血红蛋白含量的不同,表现的颜色也不一样。McCoy's 5A培养基供应价格
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基。胎牛血清中含有生长因子等蛋白质,且抗体含量少。细胞生物学的研究人员通常会在培养基中加入一定比例的胎牛血清,以帮助维持体外培养(invitro)的细胞的存活。但胎牛血清的组成复杂多变,研究人员一般将其视作成分不明的混合物,认为其可能增加实验结果的不确定性。如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。McCoy's 5A培养基供应价格
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