胎牛血清(fetalbovineserum)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基。胎牛血清含有各种生长因子,且抗体含量少。胎牛血清是细胞培养中的重要工具,如何判断它的质量高低,是一个历史悠久的话题。现在,我们尝试从COA这个角度帮助大家判断手上的胎牛血清质量如何。COA能证明这个批次的胎牛血清在出厂时的质量如何,但无法证明你手上拿着的这瓶同批次的胎牛血清质量如何。一批次的胎牛血清从出厂到用户手上,经历了跨境货运、报关、检疫、境内冷链仓储和配送。只有当每个环节都符合要求时,你手上的COA才有意义。胎牛血清可以使细胞传代时,将剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能够起到保护细胞不受到伤害的作用。无锡DMEM 培养基(高糖,无酚红)
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。高邮Biochannel胎牛血清胎牛血清有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。
实验室胎牛血清使用问题汇总:1、血清的保存方法。建议血清应保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,请勿超过个月。若血清瓶次无法用完,建议无菌分装至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,避免反复冻融。2、在培养基中添加了血清和维生素后,是否可以长期保存?因为些维生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解,所以新鲜培养基中添加了血清和维生素后,应该在两到三周内使用完毕。3、如何解冻血清才不会使产品质量受损?血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室温下全融。解冻血清时,必须在融解过程中规则地摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。因为长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。
胎牛血清都有哪些重要的指标:总蛋白含量,胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。pH值,根据药典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间,并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。渗透压,胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法,渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg):280-360之间。微生物,包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大,不过对于工业生产的客户来说,往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。胎牛血清的贴壁因子有助于细胞贴壁,并提供结合蛋白。
胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面:1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白,对多种重金属有高度亲和性,并可清理细胞生长环境中的氧自由基(·O),具有很强的抗氧化活性,可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用,以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂,使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时,常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。无锡DMEM 培养基(高糖,无酚红)
胎牛血清严格QC标准进行微生物、有害元素、血红蛋白、IgG含量等多项检测。无锡DMEM 培养基(高糖,无酚红)
胎牛血清使用中的常见问题:血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是更好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。无锡DMEM 培养基(高糖,无酚红)
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