单因子检测

多重荧光免疫组化技术优势1.由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的用量，节约抗体，实测确实可以提升抗体的稀释比例。3.荧光法多重免疫组化，可同时进行五个颜色通道以上，这种情况下发射光谱会重叠，我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系，从而极大地节约珍贵的样品。抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面，形成微阵列。单因子检测

MSD超敏电化学发光技术优势:1）更高灵敏度与更宽的线性范围MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log（从亚皮克级到几万皮克），能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。2）样本兼容度高，基质效应小MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，受样本性质的影响更小（如粘稠样本，悬浊颗粒样本等），因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于：血清，血浆，培养上清，细胞/组织裂解液，脑脊液，尿液，眼睛房水，灌洗液等生物学样本。3）节省样本用量，可实现多重检测传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术，为珍稀样本的研究提供了更多的数据。4）实验流程简便、快速、多元化MSD提供了更为便捷快速的实验流程，通常只需4-5小时5）信号稳定且不受显色顺序影响MSD由于基于电化学发光原理，信号分子需在电激发的情况下才能产生信号，因此整个实验流程无需避光，每孔激发与信号采集时长统一，避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异，不受操作人员技术水平差异的影响。CMA/TNFRSF17检测服务液态流式技术(Luminex)，流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等。

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。LabEx 多因子检测平台：抗体芯片，液相芯片，电化学技术为主的多种检测技术。

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。LabEx提供单细胞功能组学（IsoPlexis）服务！Luminex

LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因子检测服务。单因子检测

LabEx隆重推出抗体相关服务：FC、ELISA、多因子检测、抗体芯片……酶联免疫吸附测定（enzyme-linkedimmunosorbentassay简称ELISA）是在免疫酶技术（immunoenzymatictechniques）的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,ELISA过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体（抗原）,再加相应酶标记抗体（抗原）,生成抗原（抗体）--待测抗体（抗原）--酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色产生成正比。单因子检测

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