随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。Ham’sF-10营养混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham针对CHO细胞无血清培养设计出的一种培养基。医疗细胞培养基
L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必要的一种营养,但其在溶液中不安定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不会自发的降解。细胞运用其机制是:在细胞培训时,细胞会日益向培养液中获释一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收运用。细胞运用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养方针相像,连续的将低浓度水准的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成剩余的氨,更有利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无须适应,并且可以延长细胞的培养时间,缩减传代次数,即节约了时间也节省了钱财。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培训的细胞相比之下,活性减低得更慢。延滞期稍为延长的缘故是肽酶的释放和二肽的消化需一定的时间。NEAA(非须要氨基酸),是在MEM培养基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能下降细胞培育时细胞自身生产非须要氨基酸的副作用,有效性推动细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需。北京华晨阳细胞培养基批发厂针对细胞培养应用,我们提供多种组分的 McCoy’s 5A改良培养基。
无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。
MEMα是一种改良的MEM培养基,与MEM培养基相比MEMα培养基营养更为丰富,在MEM的基础上又添加了NEAA、**酸钠、硫酸锌、VB12、生物素、抗坏血酸等成分,广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养。不含核苷和脱氧核苷的MEMα培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应。 M199全称Medium 199,即培养基199,是Morgan等在1950年设计的,初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。
Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。 针对细胞培养应用,我们提供多种组分的MCDB改良培养基。医疗细胞培养基
Eagle培养基由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来的。医疗细胞培养基
门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),**好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。医疗细胞培养基
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