血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、元素、脂质和矿物质来源。此外,血清还可调节细胞膜通透性,并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清(FetalBovineSerum)是通过无菌手术剖腹后取胎,穿刺心脏采集血液制成。胎牛血清中所含的对培养细胞有害的成分(抗体等)非常少,故质量更高。胎牛血清经过细胞培养和杂交瘤细胞培养验证。临海标准胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
不少小伙伴对于血清的挑选、使用和储存等方面,都有不少疑惑,我们汇总了一些常见问题,并且针对这些问题,给出了相应的建议供大家参考。先来看看关于血清挑选的部分:如何挑选胎牛血清?1、胎牛血清的标准采集血液时间是5-8月龄的未出生胎牛。2、选购时询问是否有检测报告,并注意检测报告中的各类指标。3、注意血清有效期,尽量不买过期血清。4、留心观察相关人员是否专业:血清是否全程冷链运输;是否严格储存在-20℃冰箱中;工作人员对待血清态度如何;能否提供同一批次血清。Bouin's固定液多少钱解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。
什么是优良的胎牛血清?外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。
细胞和组织培养为什么需要使用血清?血清通常作为补充剂,以2-10%的浓度加入培养基中,为细胞提供综合营养、元素、生长和附着因子。血清还可作为细胞培养系统的缓冲液,避免各种因素(包括pH变化、蛋白水解活性或重金属、内毒等)干扰细胞生长或产生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷冻运输至加工工厂,解冻并检测细菌、病毒、内有害元素和血红蛋白含量等多项指标。选择更优良的血清在无菌环境下进行系列膜过滤无菌处理,然后在无菌环境下进行分装并快速冻存于-20°C,在所有批次验证达到或找过QC标准之前隔离存放。对于细胞培养而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)的重要性不言而喻。
胎牛血清使用中的常见问题:如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。胎牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。DMEM/F12采购
胎牛血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。临海标准胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
什么是优良的胎牛血清?免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采集血液的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。维生素含量,此外,维生素的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对维生素进行测试(无四环素胎牛血清理外)。其中,由于国外维生素使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含维生素或者含量极低。但是国内由于维生素使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。临海标准胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
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