胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。有下列情况者,对血清内有害元素应格外留意筛选:1.养干细胞时,干细胞对内有害元素非常敏感,如果血清中内有害元素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。2.养免疫细胞时,过高的内有害元素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内有害元素(更好≤1EU/ml),对实验至关重要。血清根据血红蛋白含量的不同,表现的颜色也不一样。MEM哪家正规
胎牛血清的保存方法:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。DMEM(高糖)培养基(含双抗)厂家供货胎牛血清促细胞生长因子、促帖附因子、元素及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清。
胎牛血清是一种天然产物,原产地牛源的生长环境和健康状况对于血清的产量和品质都有着重要影响。当产地的气候、环境等因素发生变化时,牛只数量的减少会直接影响血清产量,例如近年来澳洲爆发的森林火灾、千年难遇洪水、蓝舌病病情等,对当地畜牧产业造成了深远影响。随全球科研领域不断发展,血清需求量日益增加,合规血源变得愈发珍稀,高等血清更是一货难求。受此国际市场环境的巨大冲击,近期澳大利亚、新西兰和南美乌拉圭进口胎牛血清的原料价格持续高涨。
胎牛血清工艺流程:γ辐照处理,使用经过认证的工艺对冻存的血清进行25-40kGy剂量的γ辐照处理,并确保每批次的每瓶血清都能均匀受到辐照作用。经过γ射线辐射的血清所含病毒和外来微生物污染的可能性降低了上百万倍,而与此同时,血清的促细胞生长作用不受辐照的影响。QC检测,采用严格标准进行多次多项检测,包括牛呼吸道融合病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛细小病毒(BPV)、蓝舌病毒(BTV)、牛腺病毒(BAdV)、狂犬病毒(RABV)、呼吸道肠道病毒(REO)等病毒检测、支原体、内有害元素、血红蛋白、IgG含量、细胞生长验证以及多项生理生化检测,确保产品具有可信赖的超高等。胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清,胎牛的血清相对来说比较纯。
胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。功能:牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。胎牛血清还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。瑞安小牛血清
胎牛血清可以起到缓解酸碱度的作用,目前这方面的作用已经得到了证实。MEM哪家正规
胎牛血清保存方法:1、需要长期保存的澳洲牛血清,例如澳洲南美胎牛血清,必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现澳洲牛血清有悬浮物,例如澳洲北美胎牛血清中发现有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。MEM哪家正规
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