胎牛血清应该怎么选?稳定性,FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模及病情等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。因此,找到稳定提供同批次FBS的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,而且花在重复实验或检验新批次上的时间将很大减少。胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清,胎牛的血清相对来说比较纯。DMEM/F12销售
胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。有下列情况者,对血清内有害元素应格外留意筛选:1.养干细胞时,干细胞对内有害元素非常敏感,如果血清中内有害元素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。2.养免疫细胞时,过高的内有害元素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内有害元素(更好≤1EU/ml),对实验至关重要。Masson三色染色试剂盒直销胎牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基。
血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中,以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%:白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白,浓度为50mg/ml,约占总蛋白质量的一半。
我们都知道干细胞是十分脆弱的,培养干细胞大多使用胎牛血清来完成实验。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。优良的胎牛血清不仅为细胞提供细胞生产提供不可替代的营养成分,也会让细胞培养实验更轻松。提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。胎牛血清可以起到缓解酸碱度的作用,目前这方面的作用已经得到了证实。
胎牛血清特点:采集方法:通过密闭系统收集法保证血清质量,保证低内有害元素、低血红蛋白过滤方法:通常采用3个连续的100nm孔径的过滤器过滤检测体系:每批产品均经过严格的细菌、支原体、病毒、内有害元素、血红蛋白等检测。胎牛血清功能及作用:牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。胎牛血清对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。DMEM/F12销售
胎牛血清提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。DMEM/F12销售
实验室胎牛血清使用问题汇总:1、血清的保存方法。建议血清应保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,请勿超过个月。若血清瓶次无法用完,建议无菌分装至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,避免反复冻融。2、在培养基中添加了血清和维生素后,是否可以长期保存?因为些维生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解,所以新鲜培养基中添加了血清和维生素后,应该在两到三周内使用完毕。3、如何解冻血清才不会使产品质量受损?血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室温下全融。解冻血清时,必须在融解过程中规则地摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。因为长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。DMEM/F12销售
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