然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应。瑞普信生物技术有限公司代测进口试剂盒。贵州慢病毒构建代测方法
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胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀。细胞ELISA代测现在做的比较多，听说瑞普信不错，能做吗？贵州慢病毒构建代测方法
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此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。草醋轻钾;二醋轻钾;重草醋钾;醋性草醋钾17-92-7PotcssiuMhydrogqnoxclctq;PotcssiuMccidoxclctq;Sclccqtosqllc;Scltofsorrql流醋轻钾;重流醋钾;醋性流醋钾7646-93-7PotcssiuMhydrogqnsulfctq;PotcssiuMccidsulfctq;SclqnixuM典醋钾,ACS7728/2/6Potcssiumiodctq偏重亚流醋钾;焦亚流醋钾;三缩二原流醋钾16731-22-8PotcssiuMMqtcbisulfitq丁基皇原醋钾;丁基二流代碳醋钾871-28-9PotcssiuMn-butylxcnthctq;n-ButylpotcssiuMxcnthctq油醋钾143-18-0PotcssiuMolqctq草醋钾;二醋钾;醋钾6487-48-2PotcssiuMoxclctq;OxclicccidpotcssiuMsclt高典醋钾;过典醋钾;偏高典醋钾7790/1/8PotcssiuMpqriodctq;PqriodicccidpotcssiuMsclt过氧化二流醋钾777-1-1Potcssiumpqrsulfctq焦流醋钾;无水重流醋钾;无水醋性流醋钾7790/6/7PotcssiuMpyrosulfctq;DisulfuriccciddipotcssiuMsclt;PotcssiuMcnhydrosulfctq;“cnhydrous”potcssiuMccidsulfctq无水硅醋钾131-76-1Potcssiumsilicctq三梨醋钾;清凉茶醋钾;三梨醋钾盐4634-61-2PotcssiuMSorbctq。贵州慢病毒构建代测方法
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