多因子检测数据处理

高通量蛋白组学（Olink）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！产品特点：采用独有的PEA，ProximityExtensionAssay，邻位延伸分析技术检测蛋白标志物。带有特有的核苷酸序列探针的一对抗体与被检测蛋白特异性结合后，正确且邻位探针通过末端5bp配对碱基互补结合，在延伸酶的作用下形成双链模板，利用qPCR或NGS进行检测，通过特异性的核苷酸序列信号来反应检测蛋白质的含量。PCR Array：用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化，发现变化比较明显的标志性基因。多因子检测数据处理

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。msd600超敏多因子LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。

Q：是否要用到试剂盒本身的试剂？

A：ELISA预实验要用到试剂盒的试剂，并且预实验做的样本越多，正式实验的样本可检测的就越少。

Q：ELISA实验可做波长？

A：ELISA通常是450nm，但是也有特殊实验需要其他波长。实验室可提供波长检测。光吸收：340nm/405/450/490/492/560/620nm/630nm荧光：320nm/340nm/620nm/665nm   。

Q：ELISA预实验是否要收费？

A：***次预实验不收费，第二次开始需要收取500元/次的费用每块板包含1次**预实验与1次正式实验。

蛋白分析实验技术1、MSD超敏电化学发光平台针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示，基于电化学发光技术的MSD(MesoScaleDiscovery)是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。可将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。基本原理：电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物，在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。LabEx提供蛋白水平检测服务！

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。为啥高分的文章用的都在做细胞因子的检测？msd600超敏多因子

液态流式技术(Luminex)，流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等。多因子检测数据处理

Q：样本处理方案?A：血清：不含抗凝剂的**管**，室温静置2小时（避免震动，防止溶血），离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存血浆：含抗凝剂（EDTA、肝素，具体采取哪种抗凝剂，参考说明书）的**管**，，离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存细胞裂解液：收集细胞，PBS清洗后，离心10min（1000g，4℃），弃去上清，加入适量裂解液（107细胞对应200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存组织裂解液：适量RIPA裂解液加入组织中（10mg对应100-200ul裂解液），组织破碎器处理组织至匀浆（冰上处理），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存细胞上清：离心，取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存多因子检测数据处理

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