在哪些应用场景需要对病毒的全基因组进行测序?在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。病毒株都需要获得尽量完整的基因组序列来指导下一步的研究。国内二代测序分析检测
在探普生物进行病毒基因组测序的流程是怎么样的?在探普生物进行病毒基因组测序非常简单,简而言之,客户只需要说清楚样品情况,准备样品即可,其他事宜都由探普来进行安排。大致流程如下:1)与销售人员沟通项目需求和样本情况;2)探普生物工作人员拟定项目合同,双方协商合同内容后签字盖章;3)按样本准备指南准备好样本,填写信息单后通知销售人员预订干冰,安排样本寄运输;4)客户支付项目启动款,探普生物启动项目实验和分析并提供测序报告;5)客户支付项目尾款,探普生物提交测序数据和分析结果;6)售后问题处理,项目结题。上海病毒全序列测序分析公司二代测序相较sanger测序,差异主要就是单次运行可以获得海量的数据量。
目前对我国首例输入性裂谷热病例病毒进行全基因组测定,分析其进化来源及潜在变异.方法提取样本核酸,非特异性反转录扩增病毒基因组RNA,使用IonTorrent二代测序仪进行病毒全基因组测定.对获得的基因组数据进行序列拼接、比对、进化树构建和关键位点分析.结果通过测定获得了病毒全基因组11979nt,该测定病毒属E基因分支,序列与先前南非分离株Kakamas相似度较高(>98%).病毒Gn蛋白C端信号肽区存在1个氨基酸突变.结论本研究分析测定的裂谷热病毒全基因组与目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出现明显变异。
一直以来,病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比,NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列,测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大,其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本,研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性,丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本,无法通过PCR进行富集,要鉴定其种类需要调用各种方法,逐个尝试,工作量之大,其效率之低,使得一个新的研究方法的出现及其必要。在探普生物长时间运行过程中,接触到的对病毒的全基因组进行测序的项目有比较丰富的应用场景。
有哪些技术手段能实现对病毒的全基因组进行测序呢?早期在高通量测序技术普及之前,对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后,可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高,读长很长,但与此同时,扩增和克隆工作费时费力,由于流程繁琐,加上快速变异导致引物无法通用,该方法对于大量基因组的测序工作而言,可操作性不强,这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析,减少了工作量,增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试,开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序,该流程自运行以来广受研究者们好评。 对病毒全基因组进行测序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。四川二代测序要多久
病毒全基因组测序具有的特点:采用高通量测序仪,全流程质控。国内二代测序分析检测
在病毒全基因组测序中,生物信息学的工作主要包括以下几个方面:序列组装:将测序得到的短reads进行组装,得到较长的基因组序列。这一步需要结合多种方法和算法,如比对算法、短reads组装算法等。序列注释:对基因组序列进行注释,包括基因预测、基因功能注释、基因组结构注释等。系统发育分析:通过比较不同病毒基因组序列的相似性,确定不同病毒的进化关系。基因功能预测:通过比较基因组序列与已知的蛋白质序列,预测基因组编码的蛋白质的功能。变异检测:通过比对不同个体的基因组序列,检测其中的变异,包括单核苷酸多态性(SNP)、插入缺失等。数据分析:对测序数据进行质控、过滤、拼接、比对、序列注释、系统发育分析、基因功能预测、变异检测等一系列分析,生成相应的数据报告。综上所述,生物信息学在病毒全基因组测序中扮演着非常重要的角色,探普生物通过对基因组序列进行分析和解读,能够帮助我们更好地了解病毒的遗传信息、进化历史、生物学特征等方面的信息。 国内二代测序分析检测