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细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都相对较高。近期还有PEIfree申请活动,欢迎咨询上海曼博生物!欢迎关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“申请PEI”,即可参加活动!更多关于Polysciences PEI转染试剂相关产品信息,欢迎咨询上海曼博生物!即用型PEI转染试剂使用说明哪里有卖GMP等级的PEI转染试剂?
产品特点:PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是线性化聚乙烯亚胺PEI25K的升级产品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.盐酸盐形式,具更高的水溶特性;3.含更长连续性乙烯亚胺片段,其质子化氮水平比PEI25K提高11%以上。应用领域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等级的PEI转染试剂,适用于基础学术研究和药物研发早期阶段,以固体粉末形式提供,需用户自行配置(详情见使用方法)。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!
1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。更多关于PEI转染试剂相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!近期还有PEIfree申请活动,欢迎咨询上海曼博生物!欢迎关注我们的公众号Mine-bio,回复“PEI转染试剂”即可领取!哪个品牌的PEI转染试剂转染效率更好?
稳定转染方法1.接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。若想咨询更多关于PEI转染试剂相关信息,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注公众号Mine-bio回复“PEI申请”申请试用装!有哪些比较好的转染试剂?重庆PEI转染试剂价格
哪个品牌的PEI转染试剂性价比会比较高呢?国产PEI转染试剂好用么
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【详情】注意事项质粒质量:请务必使用高质量转染级无内质粒(推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒...
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【详情】产品简介:Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,P...
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