人原代β细胞的可用性有限,从人胰岛制剂中纯化β细胞具有挑战性。在啮齿类动物中,β细胞系自 20 世纪 70 年代初以来就已经可用,并且在研究β细胞功能方面非常有用。然而,啮齿动物的β细胞并不是研究人类β细胞的理想选择,因为人类和啮齿动物的β细胞在许多方面彼此不同。例如,在啮齿类动物中,胰岛素由 2 个基因编码,而在人类中,只有 1 个基因编码。啮齿动物和人类β细胞的功能差异是由于葡萄糖转运和磷酸化在葡萄糖感知中的相对作用不同。IFNg 和 IL1b 处理细胞 24 小时后进行 RNA-seq 以检查 EndoC-BH5 细胞对细胞因子的反应性。GMP糖尿病细胞模型胰岛素分泌性强
EndoC-βH5细胞是一种新型人类胰腺β细胞解决方案,可用于开发人类糖尿病模型以及药物筛选和验证平台,产生流程为:DNA构建,慢病毒载体产生,人胎儿胰腺外植体与pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒载体共转导,移植到SCID小鼠的肾囊下,导致八个月后形成胰岛素瘤,从而获得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5细胞分别在Opti-β1和Ulti-b1培养基中的βCoat涂层塑料板上培养。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次细胞。流式细胞术分析表明所有EndoC-βH5细胞均呈胰岛素阳性,并且在绝大多数细胞中检测到PDX1和NK6.1表达(分别为92.3%和90%)。EndoC-βH5细胞在涂层塑料上形成小的贴壁簇。四川糖尿病细胞模型操作指南糖尿病细胞模型真实模拟胰岛B细胞分泌,且分泌性强。
HumanCellDesign在人源胰岛β细胞模型的研发中不断突破,致力于提供更高效、更可靠的细胞工具。通过多年的研究和实验,HCD的科学家们成功地开发出了一系列高质量的细胞模型,这些模型在糖尿病研究中表现出优异的功能性和稳定性。这些细胞不仅能够模拟天然胰岛β细胞的胰岛素分泌功能,还能够在实验室环境中稳定生长和繁殖,为研究人员提供了宝贵的研究资源。作为一个开创性的生物技术公司,HumanCellDesign已经走在了人源细胞模型研发的前沿。通过其独特的细胞工程技术,HCD能够生成高度均一、功能性强的人源胰岛β细胞。这些细胞不仅能够在实验室环境中大量生产,还能稳定表达各种重要的胰岛细胞标记物。这些细胞模型广泛应用于糖尿病研究中,从基础研究到药物筛选,HCD的细胞系都发挥了重要作用,为科学家们提供了宝贵的研究工具。
在EndoC-βH5细胞中检测到所有对β细胞身份和功能重要的转录因子的表达。与成人b细胞相比,EndoC-βH5细胞中的表达水平相似(FOXA2、MNX1、NKX2.2)或更高(HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1)。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5细胞中以较低水平表达EndoC-βH5细胞中表达与胰岛素分泌相关的受体,包括肾上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰hao xue tang素(GCGR)、生长抑素(SSTR2)和肠jiang xue tang素受体,例如胰gao xue tang素样受体肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是,EndoC-βH5细胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1细胞中更丰富。糖尿病细胞模型可用于胰岛B细胞增殖、分化、去分化、凋亡研究。
EndoC-βH1使用慢病毒介导的基因转移从人类胎儿胰腺中产生功能性β细胞,这些胰腺处于发育的早期阶段,即9至11周,这段时间与β细胞分化的开始相吻合(33)。整合的转基因SV40LT受大鼠胰岛素启动子控制,在胰岛素阳性细胞中特异性表达。通过使用这种靶向方法,SV40LT在新形成的β细胞中表达,同时这些细胞头次产生胰岛素。因此,我们成功地模仿了用于产生功能性啮齿动物β细胞系的转基因方法(7,8,34),用于从人胎儿胰腺中开发功能性人β细胞系。法国Human cell design专注于糖尿病细胞模型研究,提供接近于天然胰岛细胞的胰岛细胞系。湖南糖尿病细胞模型600+文献验证
Human cell design为客户提供多种胰岛B细胞类型的操作手册。GMP糖尿病细胞模型胰岛素分泌性强
Humancelldesign开发了创新且安全的人类β细胞系生产方法。首先,将每个转导的人类胎儿胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的肾被膜下,因为该部位是人类胰腺发育的允许部位。在6到8个月内,所有移植的小鼠都发生了原发性胰岛素瘤,这导致它们的血糖水平下降。与其他胰腺移植相比,原发性胰岛素瘤是高度血管化的。然后将原发性胰岛素瘤中这些高度血管化的区域分离,用在大鼠胰岛素启动子控制下表达hTERT的慢病毒进行转导,并移植到其他SCID小鼠中。这些小鼠在2至3个月内出现低血糖,胰岛素阳性细胞大量扩增。这种体内扩增有助于维持大量增殖的胰岛素细胞,并允许定义允许的培养条件,在这种条件下,可以在体外建立永生化细胞系。GMP糖尿病细胞模型胰岛素分泌性强
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