企业商机

杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠应用

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的结合蛋白，进行小规模的蛋白质亲和纯化的实验。更确切地说，IP是采用固定在微珠...

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的结合蛋白，进行小规模的蛋白质亲和纯化的实验。更确切地说，IP是采用固定在微珠支持物(一般是琼脂糖树脂)上的特定抗体，从复杂的混合物中，纯化单一抗原的实验。固定化蛋白质复合物的组装既可以分步进行，也可以一步完成。

常见的加样顺序：抗体和样本(如细胞裂解物)一起孵育，然后加入亲和微珠，用于捕获抗体-抗原复合物。也可以将抗体和微珠(通过抗体结合蛋白，如蛋白A、G或A/G等，直接或间接结合抗体)先进行孵育，然后再加入含有抗原的样本。当抗原、抗体和固相支持物产生结合以后，充分洗涤微珠，再采用适当的洗脱缓冲液从支持物上洗脱抗原。

免疫沉淀技术IP是什么？杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠应用

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）是一种利用抗体与特定蛋白质结合的特性，从复杂样本中分离和纯化目标蛋白质的实验方法。这项技术在生物医学研究中有着广泛的应用场景，以下是一些主要的应用领域：

1. 蛋白质相互作用分析：通过免疫沉淀技术，研究人员可以研究蛋白质之间的相互作用，揭示蛋白质复合物的组成以及它们在细胞内的功能和调控机制。

2. 抗体药物开发：免疫沉淀技术可以用于研究抗体药物与其靶标蛋白的结合特性，评估抗体药物的亲和力和特异性，指导抗体药物的设计和优化。

3. 蛋白质表达水平分析：通过比较不同条件下的免疫沉淀结果，可以评估目标蛋白的相对量，进而研究蛋白质的表达调控。

4. 染色质免疫沉淀（ChIP）：这是一种特殊的免疫沉淀技术，用于研究蛋白质与DNA的相互作用，如转录因子或组蛋白修饰与基因组特定区域的结合情况。

5. RNA免疫沉淀（RIP）：类似于ChIP，RIP用于研究RNA结合蛋白与RNA分子之间的相互作用。

苏州Protein AG免疫沉淀磁珠应用免疫沉淀技术IP的优缺点是什么？

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，简称IP）是一种生物化学方法，它利用特异性抗体对抗原进行亲和纯化。在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A/G-Beads（预先将Protein A/G固定结合在磁珠上），根据抗原与抗体、Protein A/G与抗体的Fc的特异性，形成“抗原-抗体-Protein A/G-Beads”复合物，清洗离心后去除溶液中未结合的杂蛋白，检测是否存在目的蛋白。

免疫沉淀技术常用于从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生物分子。它的目标是分离足够用于Western Blot或其他检测方法检测的蛋白质。

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）是一种用于研究蛋白质相互作用和蛋白质特性的重要方法。它具有一些明显的优点，但也存在一些局限性。

优点:

1. 特异性强：IP技术利用特异性抗体对目标蛋白进行捕获，因此具有很高的特异性。

2. 富集低丰度蛋白：可以从小量样本中富集低丰度的目标蛋白，有助于研究稀有蛋白。

3. 研究蛋白质相互作用：通过Co-IP等变体技术，可以研究蛋白质之间的相互作用。

4. 操作简便：IP实验步骤相对简单，容易在实验室中实施。

缺点:

1. 对抗体质量依赖性高：需要高质量的特异性抗体，否则可能导致假阳性或实验失败。

2. 存在非特异性结合：样本中的其他蛋白质可能非特异性地结合到抗体或固相载体上。

3. 可能破坏蛋白质的天然构象：裂解和洗涤步骤可能破坏蛋白质的天然结构，影响其功能。

4. 可能存在背景噪声：非特异性结合可能导致背景噪声，影响结果的清晰度和解释。

免疫沉淀技术IP的原理是什么？

Co-IP（免疫共沉淀）技术主要用于研究蛋白质之间的相互作用，其实验设计如下：

1. 样品准备：Co-IP实验通常有两种，一种是内源性蛋白相互作用验证，一种是非内源性蛋白相互作用验证。内源性相互作用通过质粒共转染的方式将两种蛋白转染至同一细胞内表达；非内源性相互作用则是将含有靶蛋白的组织进行预处理及细胞裂解获得细胞裂解液。

2. 沉淀诱饵蛋白：利用磁珠偶联抗体沉淀诱饵蛋白。在样品中加入磁珠偶联抗体，抗体会与诱饵蛋白结合，利用磁铁将磁珠拉下，同时诱饵蛋白会一起被沉淀出来。

3. SDS-PAGE及WB检测：得到沉淀后，需要验证沉淀中是否存在相互作用蛋白。先利用SDS-PAGE将蛋白复合物分离，随后利用WB检测是否存在靶蛋白。

4. 实验对照设置：为了避免“假阳性”，需要设置正确的对照，包括阴性对照和阳性对照（Input组）。Input组为直接利用抗体对细胞裂解液进行WB检测，验证细胞裂解液中存在蛋白。

5. 结果真实性：确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的，而并非外源非特异蛋白。使用单克隆抗体有助于避免污染的发生。

免疫沉淀技术的优缺点？免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀技术IP的实验设计。杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠应用

免疫沉淀（Co-IP）实验中抗体的选择非常关键，因为抗体的特异性和亲和力直接影响到实验的成功与否。

1. 特异性：抗体应当对目标蛋白具有高度的特异性，以避免与其他蛋白发生非特异性结合，导致假阳性结果。

2. 亲和力：抗体对目标蛋白的亲和力要足够高，以确保在免疫沉淀过程中能够有效地捕获目标蛋白。

3. 抗体类型：单克隆抗体和多克隆抗体都可以用于IP实验。单克隆抗体提供更高的特异性和批间一致性，而多克隆抗体可能提供更强的结合能力和更广的表位覆盖。

4. 应用验证：选择已经过免疫沉淀（Co-IP）或相关应用（如Western blot, IHC）验证的抗体，这增加了实验成功的可能性。

5. 供应商信息：选择信誉良好的抗体供应商，并查看供应商提供的技术数据和客户评价，以帮助做出决策。

杭州anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠应用

上一篇：苏州支原体污染检测试剂

返回列表下一篇：广州细胞培养支原体预防货期

与免疫沉淀相关的文章

杭州ChIP免疫沉淀磁珠的选择 2025-04-21

免疫沉淀的操作流程相对严谨。首先，需要获取高质量的细胞裂解液，确保细胞内的各种分子保持天然活性。接着，加入适量且经过验证的特异性抗体，在适宜的温度和条件下孵育，让抗原与抗体充分结合。之后，加入固相载体，经过洗涤步骤，去除未结合的杂质，通过洗脱，得到纯净的抗原 - 抗体复合物，以便后续的分析。这项技术在众多领域都发挥着关键作用。在蛋白质组学研究中，免疫沉淀可用于鉴定与特定蛋白质相互作用的其他蛋白，帮助我们理解蛋白质之间的信号传导通路。在疾病研究方面，通过免疫沉淀分析患者样本中特定蛋白的表达和修饰情况，有助于揭示疾病的发病机制。例如在研究中，免疫沉淀可以帮助研究人员发现与发展相关的关键蛋白。随着科...

与免疫沉淀相关的产品

与免疫沉淀相关的问题

与免疫沉淀相关的热门

与免疫沉淀相关的标签

免疫沉淀

产品推荐

杭州ChIP免疫沉淀磁珠的选择 2025-04-21

杭州anti Flag免疫沉淀磁珠价格 2025-04-21

杭州蛋白免疫沉淀磁珠应用 2025-04-21

ChIP免疫沉淀外包公司 2025-04-21

北京细胞支原体检测试剂厂家 2025-04-21

查看更多 +