常见的重组蛋白药物:生长因子viii,帮助血友病患者形成血块;非格司汀和sargramostim(造血骨髓因子),促进放疗或移植后白细胞计数;胰岛素,用于糖尿病;IGF1,用于某些生长问题;干扰素(阿尔法),用于乙型和丙型肝炎、生殖器疣、某些白血病和其他疾病;干扰素(β),用于多发性硬化症;干扰素(伽玛),用于慢性肉芽肿病;白细胞介素-2,杀死病变细胞;生长因子,用于生长因子缺乏症;组织纤溶酶原actin剂(t-PA),溶解血凝块,预防心脏病发作,减轻其严重程度。PeproTech提供多种高质量细胞因子和重组蛋白,包装规格多,备受科学家青睐。R&DSystemsBMP-1重组蛋白怎么样
CHO细胞即:中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳动物表达载体,是用来表达外源蛋白多也是成功的一类细胞。市场上超过70%的蛋白质药物选择的制造细胞就是CHO细胞。CHO细胞可以在外源表达的蛋白质上掺入复杂的聚糖,如N-连接聚糖。有助于蛋白质的折叠和细胞内运输。重组蛋白表达侧重于大化每个分子中含有唾液酸的复杂聚糖的数量,CHO细胞糖基化之后,能增加对蛋白水解的抵抗力和延长体内血清半衰期,所以CHO细胞成为用作重组蛋白的哺乳动物细胞系。进口BMP-3重组蛋白重组蛋白的表达系统有多种。
体外生产重组蛋白的表达系统中,哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供较接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源重组蛋白质,在活性方面高于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这些特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是重组单抗药物的研发和生产中的具有极大的应用。
糖基化是指糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质,帮助蛋白质折叠功能作用。在大多数情况下,生长因子或细胞因子的糖基化作用不会直接影响该蛋白与受体之间的结合。所以在体外研究中,重组生长因子或细胞因子的生物活性不会受糖基化作用的过多影响。不过,糖基化蛋白通常对蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在体内的半衰期比未经无糖基化的同种蛋白更长。因此在体内研究中,以选择哺乳动物表达系统或昆虫表达系统生产的重组蛋白可能是比大肠杆菌中生产的同种重组蛋白效果更好的一个选择要好。重组蛋白疫苗有着天然的优势。
哺乳动物蛋白表达系统在生产重组蛋白中的应用中,优势明显。具体表现为以下方面,能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性:哺乳动物为真核细胞,细胞器可以对蛋白正确折叠加工。表达水平高:载体可在哺乳动物细胞中高表达重组蛋白,表达量可高达1-3g/L。蛋白表达高效稳定:高效启动子控制,稳定表达,并可以选择多种表达,如瞬时表达、稳定细胞株表达、营养缺陷型细胞株表达(DHFR/GS)、大规模悬浮细胞表达等。适合大规模蛋白表达:常用的哺乳动物表达宿主细胞(HEK293和CHO),使用悬浮细胞培养,可以在一个月内可产生数克级蛋白。重组蛋白的生物学活性定义。进口BMP-2重组蛋白
重组蛋白是生物医药行业研发及生产中的关键生物试剂。R&DSystemsBMP-1重组蛋白怎么样
近年来,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品迅速增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白的表达优化,到小量诱导纯化,再到中试、大规模生产需要众多繁琐、大量的工作。快速、可靠、高效的自动化分离分析技术可极大地提高效率,降低时间、人员成本。R&DSystemsBMP-1重组蛋白怎么样
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