单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,极大提高了抗体的生产量。多克隆抗体生产的成本较高,但其应用普遍,具有潜在的商业价值。江苏单克隆抗体研发团队
抗体J链和分泌片:Ig轻链和重链除上述基本结构外,某些类别的Ig还含有其他辅助成分,如J链和分泌片。J链(joining chain)是一条富含半胱氨酸的多肽链,由浆细胞合成,其主要功能是将多个Ig单体连接为多聚体。2个IgA单体由J链相互连接形成二聚体,5个IgM单体由二硫键相互连接,并通过二硫键与J链连接形成五聚体。IgG、IgD和IgE常为单体,无J链。分泌片(secretory piece,SP)又称为分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,为一种含糖的肽链,由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合于IgA二聚体上,使其成为分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保护SIgA的铰链区不被蛋白水解酶降解。安徽IgD抗体研发制造多克隆抗体的希望主要集中于富集特定细胞亚群,开发更多临床应用。
IgE是什么?与过敏有什么关系?说IgE之前,我们先来了解一下抗体,它的本质是蛋白质,确切地说,它是一种具有免疫功能的球蛋白,存在于血清、体液、外分泌液和一些细胞膜上,因此也叫做免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)。人体至少有5种免疫球蛋白,各自具有不同的免疫学功能,包括IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。其中与过敏关系密切的是IgE抗体。IgE是Ⅰ型超敏反应机制中重要的免疫分子,自1967年IgE纯化以来,血清学检测已成为诊断超敏反应疾病常用的检测方法。
IgE是什么?与过敏有什么关系?IgE是如何参与过敏反应:IgE的尾巴则和效应细胞(肥大细胞、嗜碱性粒细胞)粘住。上述过程称为“致敏”。游离状态的IgE抗体半衰期是2-3天,如果长期不接触变应原,致敏状态可逐渐消失。但是,当此过敏原再次进入机体后,人体免疫系统就立即被认识它的IgE抓住,IgE的尾巴给肥大细胞报信,细胞释放组胺等炎性介质,使血管扩张,腺体分泌增加等,作用于组织部位,从而引发各种过敏症状。在各类过敏性疾病中,IgE与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的特异性受体结合,导致细胞信号启动,因此在过敏体质或超敏患者中,血清中总IgE水平明显高于健康人群。单克隆抗体可以用于诊断和调理多种疾病。
抗体特性和功能:IgG于出生后3个月开始合成,3~5岁接近成人水平。IgG是血清和体液中含量很高的抗体,占血清总Ig的75%~80%。人lgG有4个亚类,根据其在血清中浓度的高低排序,分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期为20~23天,是再次免疫应答产生的主要抗体,其亲和力高,在体内分布普遍,具有重要的免疫效应,是机体抗传染的“主力军”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿过胎盘屏障,在新生儿抗传染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通过经典途径活化补体,并可与巨噬细胞、NK细胞表面Fc受体结合,发挥调理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通过其Fc段与葡萄球菌蛋白A(SPA)结合,借此可纯化抗体,并用于免疫诊断。某些自身抗体如抗甲状腺球蛋白抗体、抗核抗体,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反应的抗体也属于IgG;单克隆抗体可以用于调理自身免疫性疾病。深圳Prestige抗体试剂
单克隆抗体可以用于研究生物学过程和药物开发。江苏单克隆抗体研发团队
抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,只被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗有害素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。江苏单克隆抗体研发团队