血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。作为培养细胞的好帮手,血清的品质决定了细胞培养的成败。在血清解冻后发现浑浊及絮状物质时,不必惊慌,这是正常现象。常见血清的沉淀物有以下几种:纤维蛋白:可以用肉眼观察到的、较大的沉淀物,可以达到1-2mm;磷酸钙:常见的一种沉淀物,会造成血清浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,并且由于布朗运动看上去像在活动,因此经常被误认为是微生物污染;其他:胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。血清可以用于制备疫苗和抗毒成分等生物制品。浙江干细胞血清替代产品
血清的长期储存:血清在生产制备完成后,通过质量检测,然后被运送至市场上销售。整个过程中,包括运输流程,储存温度应严格保证在-20℃,避免反复冻融影响血清活性。实验人员在收到血清,检查完好后,及时将血清送至-20℃冰箱中储存,用时再取出采用三步法解冻。在未解冻的情况下,血清可长期储存在在-20℃或-80℃环境中,只要是在保质期内,均能正常使用。储存过程中,需要定期监控储存血清的冰箱中,温度是否符合规定,保证冰箱制冷效果(-20℃)是否正常,尽量避免出现温度大幅度的波动的情况,防止血清因温度变化而反复冻融的情况出现。另外,尽量将血清单独存放于一定区域(恒温区域),避免反复开关冰箱门对储存温度造成影响。南京细胞培养血清血清可以用于生物学研究,如细胞培养、蛋白质纯化等。
血清的成分多样,可以给细胞提供:1.基本营养物质,如氨基酸、维生素、脂类物质、无机物、核酸衍生物等细胞生长必需的物质;2.生长因子:表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板生长因子、神经细胞生长因子等;3.结合蛋白:结合蛋白在细胞代谢过程中起着重要作用,它能携带重要地低分子量物质,如转铁蛋白结合铁离子,白蛋白携带维生素等;4.促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤;5.蛋白酶抑制剂:中和某些细胞(如内皮细胞等)释放的蛋白酶,从而对培养中的细胞起到某些保护作用;6.血清含有的一些微量元素和离子在代谢中起重要作用,如SeO3,硒等;7.血清蛋白使血清具有一定的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,如悬浮培养搅拌时保护细胞。
如何避免沉淀物的产生?1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清的保存和运输需要严格控制温度和湿度等因素。
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。在细胞培养中的作用主要有以下几点:1.提供对维持细胞指数生长的激生素,特别是基础培养基中没有或量很少的营养物,还包括一些主要的低分子营养物;2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激生素等,能结合或调变它们所结合的物质活力;3.血清中含有一些微量元素,有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解放毒性作用;4.细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源;5.血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用;6.抑制蛋白酶的作用,在贴壁细胞传代时可将剩余胰蛋白酶失活,从而保护细胞。血清的生产需要严格控制质量和安全。广东自体血清管理团队
血清的制备需要考虑动物福利和保护环境等因素。浙江干细胞血清替代产品
对胎牛血清进行过滤和除菌的步骤如下:1.准备过滤器和滤膜:选择合适的过滤器和滤膜,通常使用0.22微米的滤膜。2.准备消毒液:选择合适的消毒液,如70%的乙醇或10%的次氯酸钠溶液。3.消毒过滤器和滤膜:将过滤器和滤膜放入消毒液中浸泡一段时间,然后用无菌水冲洗干净。4.过滤胎牛血清:将胎牛血清倒入消毒过的过滤器中,使用真空泵或压力泵进行过滤。5.消毒过滤后的胎牛血清:将过滤后的胎牛血清放入消毒液中浸泡一段时间,然后用无菌水冲洗干净。6.检查胎牛血清:检查过滤后的胎牛血清是否无菌,可以进行菌落计数或培养试验。注意事项:1.操作过程要保持无菌环境,避免污染。2.消毒液要充分冲洗干净,避免残留。3.过滤器和滤膜要选择合适的型号和规格,以保证过滤效果。4.检查胎牛血清的方法要正确,避免误判。浙江干细胞血清替代产品