一直以来,病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比,NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列,测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大,其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本,研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性,丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本,无法通过PCR进行富集,要鉴定其种类需要调用各种方法,逐个尝试,工作量之大,其效率之低,使得一个新的研究方法的出现及其必要。
探普生物病毒测序具备样本准备简单的优点。病毒全基因组二代测序分析服务
高通量测序技术具有的作用:高通量测序技术在冠状病毒的鉴定中发挥了重要作用,先通过该技术确认了该病原为以前未知的β冠状病毒,其次确认了该病毒与蝙蝠相关冠状病毒ZC45和ZXC21密切相关,同源性约为88%,后高通量测序为后续的诊断提供了强有力的技术支撑。高通量测序能否定向检测细菌病毒等微生物?例如某人有皮肤病,提取组织,能否通过高通量测序来检测后列出所有的致病菌。或者当怀疑的时候,在人体组织中检测是否有某种特定的细菌或者病毒。(不求原理),就是想知道现在的测序技术能否替代传统临床检验方法。相比传统培养等方法,对样本的全微生物检测,或者特定微生物检测,基因测序技术目前的时间消耗,准确率,和金钱成本大概如何。可以定向检测,用特异引物就可以。
成都深度测序排行病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析。
病毒基因组的结构特点有哪些? 病毒基因组大小相差较大。 病毒基因组可以由DNA组成,也可以由RNA组成。 多数RNA病毒的基因组是由连续的核糖核酸链组成,还没有发现有节段性的DNA分子构成的病毒基因组。 病毒基因组的大部分是用来编码蛋白质的。 病毒基因组DNA序列能上相关的蛋白质的基因或rRNA的基因往往丛集在基因组的一个或几个特定的部位,形成一个功能单位或转录单元。 除了反转录病毒以外一切病毒基因组都是单倍体,每个基因在病毒颗粒中只出现一次。 噬菌体(细菌病毒)的基因是连续的;而真核细胞病毒的基因是不连续的,具有内含子。
病毒基因组测序包括完成图测序、扫描图测序和重测序三个层面,通过二代/三代测序平台,获得病毒的基因组的序列信息,并在结构基因组学、比较基因组学层面通过差异分析、同源基因分析、共线性分析、物种进化分析等手段探究病毒的毒力系统、基因组的进化与演变历程等。对疑似传染标本采集提取后直接进行高通量测序,通过病原微生物数据库比对和智能化算法分析,获得疑似致病微生物种属信息,并提供全方面深入的报告,为疑难危重传染提供快速准确诊断依据,促进药物的合理应用。
高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析。
二代测序应用的患者类型的推荐:共识明确指出了二代测序应用的患者类型及使用的时机的意见:对于神经系统急性传染/血流传染/呼吸道传染患者,3天是二代测序使用的时机,在传统方法(常规的生化检查和培养)3天未报阳性且经验性调整无效时,强烈推荐二代测序检测;对疑似病毒传染患者,包括:疑似神经系统病毒传染和病毒性肺炎且病情持续进展的患者,若完善传统PCR检测后依然未获得明确的病原学证据时,强烈推荐二代测序检测。对于疑似局灶性传染患者完成常规的生物化学、培养或PCR检测后,若未能获取病原学诊断结果,推荐将二代测序作为检测方法。而对于怀疑继发性血流传染患者:在原发传染灶的病原学检测为阴性或因各种因素无法送检合适标本的情况下,可考虑将血标本的二代测序检测作为二线检测。
病毒全基因组进行测序,"基因测序"是什么?让我们来揭开它神秘的面纱。DNA二代测序方法
高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析.病毒全基因组二代测序分析服务
需要对病毒的全基因组进行测序的应用场景:在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。
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