WB检测蛋白实验报告范本-成都瑞普信生物技术有限公司。时间就是金钱,效率就是生命唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就。实验报告书实验报告书项目名称项目名称Westernblotting检测组织中蛋白表达检测组织中蛋白表达客户姓名客户姓名合同号合同号项目负责人项目负责人一、一、实验仪器与试剂实验仪器与试剂时间就是金钱,效率就是生命唯有惜时才能成功,唯有努力方可成就表格一实验仪器表格一实验仪器仪器仪器厂家厂家型号型号小型垂直电泳槽Biorad164-8001转印槽BioradTrans-Blot脱色摇床常州澳华TY-80B电泳仪上海天能EPS-200低温高速离心机64RBECKMAN酶标仪ThermoScientificMultiskanSpectrum表格二试剂表格二试剂试剂试剂厂家厂家RIPA裂解液碧云天PMSFAmrescoBCA蛋白定量试剂盒ThermoTrisAmresco甘氨酸Amresco盐酸国药集团甲醇国药集团Tween20国药集团SDS国药集团TEMEDSigmaBSASigmaPVDF膜MilliporeHRP标记的羊抗小鼠二抗联科生物化学发光检测试剂ThermoDH鼠单克隆抗体联科生物预染蛋白marker碧云天X光胶片柯达二、二、实验步骤实验步骤1、组织中蛋白上清液的制备和浓度测定1把组织剪切成细小的碎片;2加入200μL裂解液,在匀浆机中研磨,直至裂解液中组织消失。真实检测,就找成都瑞普信!四川实时荧光定量PCR第三方检测报告
WB(Westernblot),即蛋白印迹或免疫印迹(immunoblotting),是一项在分子生物学、生物化学、免疫学等领域中应用非常广的技术。这一技术利用抗体与组织或细胞样品中特定蛋白的特异性结合作用,根据显色条带的位置和强弱实现蛋白鉴定和表达分析。WB技术具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性。选用合适的内参抗体能够校正蛋白定量和上样过程中的误差,通过灰度计量可以定性或定量分析不同样品中蛋白表达情况。做第三方检测时为什么有时候条带会出现拖带或者弯曲?在使用特定裂解缓冲液时,或者一些植物或脂肪含量高的样品中成分较复杂,会对电泳条带产生干扰;样品变性不彻底、有降解发生、修饰、上样过大等情况会导致拖带,凝胶不均匀、电泳装置渗漏、电压/电流过大、胶孔不平等原因会导致条带弯曲,当很小分子量的蛋白电泳到接近凝胶下沿时也会出现条带扭曲。四川实时荧光定量PCR第三方检测报告成都瑞普信生物技术有限公司专业第三方检测Western Blot。
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磷酸化蛋白的WB第三方检测在实操过程中有哪些注意事项?“研究完某一蛋白的磷酸化情况后比较好也要研究一下该蛋白总的表达量 ”。这有两种方法,一是:相同的 sample 在不同的 well 中上样两次,可在相同的gel上,也可在不同的gel。其一压磷酸化蛋白,另一压该蛋白总的表达量(包括磷酸化和未磷酸化的该蛋白),甚至还可跑另一个 gel ,压内标。但是本人不建议如此做,因为这样比较时误差还是较大的。因此,比较公认的,本人也建议如此的方法,即:将原先结合上的磷酸化抗体及二抗用 strip solution 洗去。可靠的基础实验第三方检测公司,就找成都瑞普信。四川实时荧光定量PCR第三方检测报告
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