深度测序技术称为深度测序(deepsequencing),是因为它是对传统测序技术的一次性改变,它通过一次性对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定(之前只是几十至多几千个碱基),同时,如此的高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全方面的分析成为可能。你以为深度测序只是一种“养”在实验室“深闺”中摸不着、看不透的高精尖技术?错!错!错!深度测序技术的巨大发展,与计算机的发展历程有着类似之处,它将对人类的科学、经济和社会三个方面产生深远的影响。DNA病毒基因组测序:获得一种指定DNA病毒尽量完整的序列。病毒序列测序分析服务
对病毒的全基因组进行测序时,生物信息学分析是如何进行的?生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,专门搭载了生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。生物信息学流程主要包括对非目标数据进行去除以及对目标序列进行筛选,高质量高完整度的序列拼接以及后续的高级分析,如SNP分析,进化分析,耐药位点分析等。在探普的流程下,可以获得完整性很高的基因组序列。病毒序列测序分析服务病毒是由一种核酸分子与蛋白质构成或只由蛋白质构成。
在哪些应用场景需要对病毒的全基因组进行测序?在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。
全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。通过对病毒全基因组高通量测序可以在较短时间内获取病毒的全部基因信息,解释病毒的来源。
探普生物进行病毒基因组测序的流程:在探普生物进行病毒基因组测序非常简单,简而言之,客户只需要说清楚样品情况,准备样品即可,其他事宜都由探普来进行安排。大致流程如下:1)与销售人员沟通项目需求和样本情况;2)探普生物工作人员拟定项目合同,双方协商合同内容后签字盖章;3)按样本准备指南准备好样本,填写信息单后通知销售人员预订干冰,安排样本寄运输;4)客户支付项目启动款,探普生物启动项目实验和分析并提供测序报告;5)客户支付项目尾款,探普生物提交测序数据和分析结果;6)售后问题处理,项目结题。病毒全基因组测序具有的特点:完善的售后服务。国内深度测序诊断
高通量测序技术是对传统测序一次性的改变。病毒序列测序分析服务
病毒全基因组测序注意事项:病毒全基因组测序,测序覆盖度,基因组被测序得到的碱基覆盖的比例;测序覆盖度是反映测序随机性的指标之一;测序序深度与覆盖度之间的关系可以过Lander-WatermanModel(1988)来确定。当深度达到5X时,则可覆盖基因组的约99.4%以上。通过生物信息手段,分析不同个体基因组间的结构差异,同时完成SNP及基因组结构注释。DNA突变可诱发病症。吸烟过程中所释放的>60种致病化学物质可与DNA结合并对DNA链上的鸟嘌呤和腺嘌呤进行化学修饰从而产生大的加合物,该加合物改变了DNA双螺旋的结构,如果不被核苷酸剪切修复或其他的途径进行纠正,那么DNA在复制时就会按照non-Watson-Crick方式进行复制并阻止RNA聚合酶进行转录。病毒序列测序分析服务
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