培养基的配制：分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶：若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15～20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装：液体培养基一般装4～5ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3～4ml，约试管的1/5高度。包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。贮存：培养基在30℃下放置，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。自动培养基制备器可以快速的准备好灭菌，放入灭菌锅。湖南全自动培养基制备器
培养基制备的基本方法和注意事项：1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。2．培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。较终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。湖南不锈钢内桶培养基制备器异养微生物的合成能力较弱，不能以CO2作为碳源或主要碳源，故应在培养基中至少添加一种有机物。
培养基pH值不在标准范围内的问题：出现此类情况有很多原因，生物大致分为①厂家质量：出厂时pH不稳定。②灭菌问题：是蒸压过高或杀菌时间过长，导致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题：采用去离子水/蒸馏水/纯净水等，不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度：储存温度过高。⑥光线直射等六种原因，可逐一检查排除解决问题。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。
培养基的灭菌：培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌，各种培养基的灭菌时间和压力，按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min，但容器和装量较大时，应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，连续3d，间歇灭菌。血清或组织液，采用低热56—58水浴1h，连续5—6d灭菌，一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等，可用细菌过滤器，过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行，必须逐渐加热，彻底排除灭菌器内的空气，再逐渐升压保持预定的压力和时间，达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认，如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。制备培养基的操作要点：固体培养基在实际中用得十分普遍。
微生物检验培养基制备的要点：培养基摆斜面，灭菌完成后，将试管中的中海琼脂培养基放在木棒或玻璃棒上，同时它很热，并且有适当的坡度。冷却后使琼脂凝固并变成斜面。斜面长度不超过试管的二分之一。微生物培养基质检，检验培养基灭菌后，发现有破损，浸水，颜色异常，棉塞被培养基污染。所有这些都必须丢弃，不能重复使用，并确定其很终pH值。无菌检查和效果检查也是必需的。无菌检查是取1~2瓶无菌培养基，37℃孵育一两天，确认无细菌生长；效果检查是将标准菌株接种到相关培养基上进行细菌检查。动物的生长、形态和生化条件与已知条件一致。两个条件都合格，准备好的培养基就可以使用了。全自动培养基制备仪主要特点：无需排干空气。湖南全自动培养基制备器
培养基制备器试管塞不要塞得太紧（使用硅胶塞的时候），勿使用橡皮塞。湖南全自动培养基制备器
培养基制备器：培养基的种类繁多，但制备的方法大同小异，一般可分为6个步骤：用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅，放置离子混入培养基中，影响微生物的生长。3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍，预防出现溢出情况。4、在对培养基进行加热时，若培养基内含有琼脂粉成分，则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热，预防发生局部烧焦及沸腾溢出。5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，较多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。6、而当对培养基实施灭菌时，需严格按照说明规范操作。但是也不能盲目按照说明的时间进行，需结合实际情况，合理调节灭菌时间，防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。湖南全自动培养基制备器
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