配制培养基应遵循的几个原则:1、目的明确:培养不同的微生物必须采用不同的培养条件;培养目的不同,原料的选择和配比不同;2、营养协调:微生物细胞组成元素的调查或分析,是设计培养基时的重要参考依据,微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。3、理化适宜:指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。4、经济节约:配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份,特别是在发酵工业中,以降低生产成本。培养基制备器使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。湖南Systec培养基制备器
培养基的过滤澄清:液体培养基必须较全澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白.强力振摇3-5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。福建全自动培养基制备器培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。
培养基配置原则:控制pH条件,当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基pH不会过度降低;如果培养基中OH-浓度增加,OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。但KH2PO4和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内(6.4-7.2)起调节作用。有些微生物,如乳酸菌能大量产酸,上述缓冲系统就难以起到缓冲作用,此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐(如CaCO3)来进行调节,CaCO3难溶于水,不会使培养基pH过度升高,但它可以不断中和微生物产生的酸,同时释放出CO2,将培养基pH控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统,如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质,也可起到缓冲剂的作用。
微生物检验培养基制备的要点:培养基灭菌处理:分装完成的培养基应马上灭菌。其杀毒灭菌方式主要有三种类型:高压蒸汽灭菌方式,此方法可用于大多数耐热培养基。对于小份:使用121°C十五分钟;大份:121°C三十分钟;对于含碳水化合物的中.海培养基,需113~115°C十五分钟。灭菌以避免糖分的破坏。煮沸灭菌法方式,此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。过滤除菌方式,过滤除菌,采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当中'海培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。培养基成份的混合与溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。培养基制备器完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定,一般都是在无菌状态下储存,定量使用的。河北全自动培养基制备器
制备培养基的操作要点:液体培养基所配制的培养基是液态的。湖南Systec培养基制备器
培养基的购置:从培养基自身的质量来看,不同生产厂家的产品,甚至同一厂家不同批号的产品都会存在差异。依据ISO/IEC17025《检测和校准实验室能力的通用要求》,对培养基的供应企业进行评价后选择合格的供应商,这是培养基购买过程中重要的步骤。应选择产品市场信誉度高、有质量保证能力和服务保证能力的企业;企业是否通过了质量管理体系的认证是较为客观的评价指标。要求生产企业提供:培养基成分名称及产品编号、批号、使用前的pH、储藏信息和有效期、性能评价和所用测试菌株、技术数据清单、质控证书以及必要的安全/危害数据等材料。湖南Systec培养基制备器
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