马铃薯培养基的制作过程:(1)称量和熬煮:按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解:把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。(3)分装:按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞:培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。福建进口培养基制备仪
培养基的称量和溶解:小心称量所需量的脱水合成培养基(必要时佩戴口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有有毒物质的培养基粉末),先加入适量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后加水至所需的量后适当加热,并重复或连续搅拌使其快速分散,必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意:培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。云南琼脂灭菌 培养基制备仪液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题:在此种情况下,建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。
培养基的安全分装:无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。分装选项:制备和灭菌过的培养基可以通过一个软管进行分装。在每次灭菌进程中,内吸管和分装口也通过进入的蒸汽进行了灭菌。分装软管和连接到该软管的分装接头必须使用合适的蒸汽灭菌工艺预先灭菌,并且必须在无菌条件下连接到分装口。基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。
培养基灭菌方法有哪五种类型:1、辐射灭菌原理方法:辐射灭菌原理:是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线,X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法:干热灭菌原理:是采用高温氧化微生物,使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法,化药灭菌原理:使用化药与微生物细胞中的成分发生反应,从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法:过滤灭菌原理:是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气,酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法:在工业生产中,用于灭菌对于培养基,管道和设备,通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间,这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理:是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力,破坏细菌蛋白质和核酸的化学键,使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。湖南大容量 培养基制备仪
有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。福建进口培养基制备仪
培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,培养基要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的保存期限以厂家提供为准,培养基开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并尽快用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、一次开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。福建进口培养基制备仪
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