牛肉膏蛋白胨液体培养基(又称营养肉汤,用于培养细菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸馏水(或去离子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:将各成分溶解于水中,于20~25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH7.4,分装三角瓶(装量以三角瓶容积的1/2~2/3为宜),或试管(分装量以试管高度的1/4左右为宜),0.1MPa灭菌15~20min后备用。化学分类:天然培养基指一类利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。组合培养基又称为合成培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。青海自动搅拌培养基制备器
培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要,但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解,造成保存时间短等问题,导致培养基的使用成本十分高。其中,在动物培养基中,谷氨酰胺是一种必要的组份,但是在常温下,很短的时间内,约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多,都具有上述的缺陷,例如,中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是这种培养基的保存时间十分有限,很难达到商业使用的目的。青海自动搅拌培养基制备器培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。
微生物发酵培养基配制注意事项:①养分浓度和配比合适:微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时,不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制:培养基的pH必须控制在一定范围内,以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择:培养基配制时,应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业,培养基用量大,使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中,制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物,必须避免被细菌污染,所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。
培养基分装仪无菌培养基制备:全自动培养基制备器能够随时随地旳获取已灭菌高质量的培养基。这能够对储藏成品培养皿的空间达到Zda限度的减少,使得对培养皿储存的管理消除,使得高质量的培养基均一性得到保证。为了满足那些需要,全自动培养基制备器被生产出来了,它不仅能够对1-30L培养基进行迅速而温和的灭菌,而且能够对灭菌过程中的时间、温度、压力等参数进行精确监控和控制,从而使所有灭菌的产品都拥有同样的得到保证。每个人都能方便的操作这台仪器,因为其有直观的图形界面及可编程功能。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。
过滤:配成的培养基,若无特殊要求,可省略此步。若有沉淀或浑浊,需要澄清的,液体培养基可用滤纸过滤。而固体培养基可用中间夹一薄层脱脂棉的双层纱布过滤。如果过滤法还不能达到澄清的要求,则可用蛋清澄清法,即培养基加热冷却到50℃~60℃,装入三角瓶内(不超过容量的二分之一),按1000ml加入1个~2个鸡蛋的蛋清,用力摇晃3min~5min,高压蒸汽灭菌121℃、20min,取出趁热过滤即可。摆斜面:装在试管中的琼脂培养基,在灭菌完成后,趁热立即摆放在木棒(或玻璃棒)上,并完成适时地斜度,冷却后,琼脂凝固即成斜面。斜面长度不要超过试管的二分之一。有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。青海自动搅拌培养基制备器
一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。青海自动搅拌培养基制备器
⑴倒置的小管充满培养基,不留气泡。⑵在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。⑶试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。⑷不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。为有效体现培养基其生物学特性,其制备生长及繁殖需要特定的PH范围。青海自动搅拌培养基制备器
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